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CNIH4通过PI3K/Akt信号通路对胶质瘤进展的影响

摘要目的:<br>  通过研究CNIH4在胶质瘤中的表达情况以及与患者预后的关系,分析CNIH4表达对胶质瘤相关生物学功能的影响;最后,探讨及验证CNIH4和PI3K/Akt信号通路在胶质瘤进展中的关系。<br>  方法:<br>  1、从中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)数据库中下载脑胶质瘤样本的转录组数据及其临床资料进行研究,下载并应用来自癌症基因组图谱计划(TCGA)数据库的脑胶质瘤患者有关CNIH4的表达、生存率和临床特征的数据进行验证。<br>  2、利用qRT-PCR、Western blot检测胶质瘤组织及其相应的癌旁组织样本中CNIH4的表达量。<br>  3、用qRT-PCR、Western blot检测,CNIH4在正常人星形胶质细胞NHA、LGG细胞系(SW1088、SW1783和BT142)和HGG细胞系(U87、U251和LN229)的表达差异;<br>  4、选择CNIH4表达量适合的细胞系,构建下调CNIH4的细胞模型,用Western blot、qRT-PCR进行验证并检测CNIH4表达水平的差异;<br>  5、通过CCK-8实验、EdU实验、平板克隆实验、划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测下调CNIH4后对U251和LN229胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;<br>  6、Western blot法检测下调CNIH4细胞模型中PI3K/Akt通路相关蛋白表达水平的变化。<br>  结果:<br>  1、CNIH4在胶质瘤中表达升高,且CNIH4基因表达越高,预后越差。单因素和多因素Cox回归分析显示,CNIH4表达是胶质瘤患者独立的预后因素。我们还发现,在胶质瘤患者中,CNIH4表达与免疫相关信号、免疫细胞浸润、免疫反应调控及化疗反应密切相关。<br>  2、qRT-PCR、Western blot结果证实胶质瘤患者的癌组织CNIH4蛋白表达较对应癌旁正常组织明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织较对应癌旁正常组织的CNIH4mRNA明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。<br>  3、qRT-PCR、Western blot结果证实多种胶质瘤细胞系CNIH4蛋白表达较正常人星形胶质细胞(NHA)明显增高,差异有统计学意义。胶质瘤细胞系较NHA的CNIH4mRNA明显增高,差异有统计学意义。而且这种差异表达在U251和LN229胶质瘤细胞系在更加明显。<br>  4、下调胶质瘤细胞中CNIH4的表达后,其增殖能力明显被抑制(P<0.01)。同样,胶质瘤细胞转移、侵袭能力明显下降(P<0.001);<br>  5、下调胶质瘤细胞CNIH4的表达后,细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平明显降低。<br>  结论:<br>  综上所述,本次研究发现CNIH4在胶质瘤中高表达,并证实CNIH4通过PI3K/Akt信号通路来发挥一系列的促癌作用。我们认为此次研究能为揭示胶质瘤的发病、进展等机制提供一个新的思路,同时也可能为研究新的胶质瘤靶向药物提供一个候选靶分子,从而造福广大的胶质瘤患者。

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导师 郭华
学位信息:
南昌大学医学部 临床医学 外科学(神经外科)(硕士) 2023年
分类号 R739.41R730.23
发布时间 2023-12-11
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