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摘要目的：<br>　　卵巢癌是目前为止较难早发现且 5 年生存率很低的妇科恶性肿瘤。由于早期缺乏有效的筛查手段，上皮性卵巢癌患者的 5 年生存率大约在 47%，主要由于初次手术不彻底和后期含铂化疗的耐药。ARHGAP30属于RhoGTP酶活化蛋白家族成员，控制许多信号转导通路真核细胞中的开关，产生多种生物学效应。研究发现 Rho GTP 酶中的 Rho A 与 PI3K 共同参与了内皮细胞血管增生反应，并形成病理血管重塑形，近期研究表明 ARHGAP30 参与肿瘤的进展。已知约 70%的 EOC 中，PI3K/AKT/mTOR 通路被上调，导致与血管生成、细胞存活和代谢相关的信号通路被过度激活。GEPIA（Gene Expression Profiling In-teractive Analysis）生信数据提示 ARHGAP30 在卵巢癌中异常表达，且在卵巢癌中高表达。然而，在EOC中ARHGAP30的表达是否存在差异，ARHGAP30的表达与 EOC，EOC 与 PI3K/AKT/mTOR 通路，以及 ARHGAP30、EOC、PI3K/AKT/mTOR 通路之间是否有着密切联系？这些是否影响肿瘤的侵袭增殖和浸润尚不清楚，需要进一步研究。<br>　　本实验旨在研究 ARHGAP30 对人上皮性卵巢癌的影响机制，探讨ARHGAP30 调控 PI3K/AKT/mTOR 信号通路的具体机制，阐明 ARHGAP30 与PI3K/AKT/mTOR 信号通路在 EOC 中相互调控的作用，对 EOC 治疗提供新的治疗思路和方向。<br>　　方法：<br>　　1、qRT-PCR、免疫组化法检测 81 例 EOC 组织及其正常卵巢组织中ARHGAP30的mRNA和蛋白表达水平；<br>　　2、qRT-PCR 法检测正常卵巢细胞（ IOSE80 ）和上皮性卵巢癌细胞（SKOV3、OVCAR3 和 A2780）中 ARHGAP30 的 mRNA 的表达情况；设计ARHGAP30 特异性 siRNA，分 NC 组，转染 SKOV3、OVCAR3 细胞组，RT-PCR检测其转染效率；<br>　　3、在 SKOV3、OVCAR3 细胞中敲减 ARHGAP30 后， EdU 法检测siARHGAP30 细胞增殖能力；流式细胞仪检 siARHGAP30 细胞凋亡变化；Transwell观察siARHGAP30细胞侵袭迁移能力；<br>　　4、采用 Western blot 检测在 SKOV3、OVCAR3 细胞中敲减 ARHGAP30 的表达后，以及通路抑制剂 Buparlisib 处理 SKOV3 和 OVCAR3 细胞后， PI3K/AKT/mTOR 信号通路关键蛋白（p-PI3K、p-AKT、p-mTOR）的表达水平变化；<br>　　5、采用 Western blot 检测敲减 ARHGAP30 及通路抑制剂 Buparlisib 处理SKOV3和OVCAR3细胞后，细胞转移、增殖和凋亡标志物的表达情况；<br>　　6、体内验证（动物实验）通过敲减 EOC 细胞（SKOV3 和 OVCAR3）中ARHGAP30的表达后，裸鼠瘤体外观、肿瘤体积、肿瘤重量表达情况。<br>　　结果：<br>　　1、EOC 组织中 ARHGAP30 的 mRNA 和蛋白丰度显著高于正常卵巢组织（P ＜0.01）；<br>　　2、EOC 细胞（SKOV3、OVCAR3、A2780）中 ARHGAP30 的 mRNA 水平显著高于人正常卵巢上皮细胞（IOSE80）；SKOV3 和 OVCAR3 细胞转染siARHGAP30 干扰 ARHGAP30 的蛋白表达后，ARHGAP30 mRNA 水平均明显敲减；<br>　　3、敲减ARHGAP30的表达后，SKOV3和OVCAR3细胞中，细胞侵袭、增殖、迁移能力明显下降，细胞凋亡显著增加；<br>　　4、敲减 ARHGAP30 的表达及通路抑制剂 Buparlisib 处理 SKOV3 和OVCAR3 细胞后，可降低 PI3K/AKT/mTOR 信号通路关键蛋白的表达， Buparlisib 显示出与 ARHGAP30 敲低相同的效果；<br>　　5、敲减 ARHGAP30 的表达及通路抑制剂 Buparlisib 处理 SKOV3 和OVCAR3细胞后，可降低细胞增殖(ki67)、转移(MMP9)和凋亡(Bax)标志物的表达，Buparlisib 显示出与 ARHGAP30 敲低相同的效果；<br>　　6、体内验证通过敲减上皮性卵巢癌细胞（ SKOV3 和 OVCAR3 ）中ARHGAP30的表达后，瘤体外观、肿瘤体积、肿瘤重量表达明显下降。<br>　　结论：<br>　　1、ARHGAP30在EOC组织和细胞中表达均明显升高；<br>　　2、敲减ARHGAP30后，SKOV3和OVCAR3细胞中，细胞侵袭、迁移、增殖、能力明显下降，细胞凋亡显著增加；并通过裸鼠动物实验（体内）得到进一步证实；<br>　　3、在 EOC 细胞中敲减 ARHGAP30 的表达后，可通过调控PI3K/AKT/mTOR 信号通路显著抑制细胞侵袭迁移和增殖能力并诱导细胞凋亡。该结果为研究 EOC 中的增殖、侵袭和潜在恶性潜能机制提供了新的思路，为治疗EOC提供了新的思路和方向。