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摘要先天免疫是机体自身防御的天然屏障，微生物感染通过生殖细胞编码的模式识别受体(PRRs)被先天免疫系统所识别。由于大多数微生物病原体在其生命周期中含有DNA和/或RNA，核酸感应已成为宿主先天免疫防御的重要策略。已知cGAS-STING通路是感知细胞质DNA，激活天然免疫信号的主要信号通路。cGAS可以识别胞质里源于病毒，凋亡，线粒体DNA，外泌体的多种线性DNA。cGAS识别线性DNA后，形成相分离，催化AMP和GMP反应生成第二信使cGAMP,cGAMP进而诱导与刺激位于内质网上的STING-TBK1-IRF3复合物的形成，导致IRF3磷酸化入核，此时STING转移到高尔基体上，发生棕榈酰化，TBK1磷酸化STING,磷酸化后的STING反过来招募IRF3介导TBK1的磷酸化，此时IRF3入核，激活干扰素和其他免疫刺激因子的转录表达。因而该通路的关键步骤在于cGAS对于dsDNA的识别作用。与此同时，细胞中还存在着一种负反馈调控机制，TREX1是一种核酸外切酶，它可以降解胞质里的DNA，从而负向调控cGAS-STING通路。近期有文献报道，cGAS与DNA形成相分离，从而介导cGAS的催化功能。而在细胞里不仅存在线性DNA，还存在染色体外的环状DNA，一种是带有转录元件的大片段环状DNA，还有一种是小片段的环状DNA，并且，已经有文献表明在人组织和孕妇血浆中主要分布的eccDNA主要为小片段的环状DNA。在之前的研究中，大多数认为能激活细胞的先天免疫系统的主要刺激因子为双链线性DNA（doublestrandDNAs，dsDNA），但是现在有意思的是，最新的研究表明，在细胞凋亡过程中会产生小片段环状DNA，这类DNA相比较于线性DNA能引起更强的先天免疫刺激反应，但是其作用机制未明。因此，本研究的目的是探索小片段环状DNA增强cGAS-STING信号通路激活的分子机制，为更好的认识eccDNA的功能机制提供更深层次的见解。<br>　　通过研究，我们确认了eccDNA对于cGAS-STING通路激活的增强作用；比较分析了不同大小eccDNA的效果，发现200bp的环状DNA能引起更明显的先天免疫反应；比较分析了线性DNA和环状DNA的转染效率，降解效率，发现线性DNA与环状DNA转染效率和短时间在细胞内的降解效率没有明显的差异；同时比较了线性DNA和环状DNA与cGAS的亲和力，发现并没有明显的差异；比较了线性和环状诱导cGAS的相分离能力，发现这个方面可能是环状DNA影响的主要方面；与此同时我们进一步通过质谱分析环状DNA特异的相互作用蛋白，正在验证其功能。