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摘要腌制蔬菜的食品安全问题一直是人们关注的焦点。市售腌制蔬菜中的亚硝酸盐含量虽然已符合国家标准，但其中残存的硝酸盐含量仍然很高。这些残存的硝酸盐被食入后在人体胃肠道内被还原为亚硝酸盐，带来潜在的致病风险。酶降解法具有专一性和高效性，是降解腌制蔬菜中硝酸盐的首选方法，然而，普通的酶在较高盐度下容易失活，亟待寻找能在高盐条件下发挥活性的硝酸盐还原酶。本研究采用免培养和可培养技术，研究翡翠湖和尕海嗜盐古菌多样性；对嗜盐古菌新类群进行多相分类学研究，确定其分类学地位；从嗜盐古菌新类群的基因组，挖掘硝酸盐还原酶基因，进而通过表达和纯化获得硝酸盐还原酶，进一步表征，以期为硝酸盐还原酶的进一步开发应用提供依据。<br>　　高通量测序结果表明，翡翠湖的古菌多样性高于尕海。翡翠湖的优势属级分类单元为Halorubrum和Halolamina，占比均为18.8%；尕海的优势属级分类单元为Halorubrum，占比为55.4%。通过可培养技术从翡翠湖共分离出85株嗜盐古菌，分属于10个属的20个种级分类单元，其中优势属级分类单元为Halalkalicoccus和Halorubrum，分别占总菌株数的32.9%和31.8%；从尕海中分离出108株嗜盐古菌，分属于12个属的27个种级分类单元，其中优势属级分类单元为Halorubrum，占总菌株数的74.1%。<br>　　从两个盐湖分离获得5株代表新分类单元的嗜盐古菌。多相分类学研究结果显示这5株嗜盐古菌分别代表5个新种，分别命名为Halomicroarculagahaiensissp.nov.（GH36T）、Natranaeroarchaeumfeicuiensesp.nov.（FCH23T）、Halalkalicoccusfeicuiensissp.nov.（FCH27T）、Natronorubrumfeicuiensesp.nov.（FCH18aT）和Natronosalvusfeicuiensisgen.sp.nov.（FCH36aT）。<br>　　从HalalkalicoccusfeicuiensisFCH27T全基因组预测到FCH27_1462和FCH27_2751两条疑似硝酸盐还原酶基因，对这两条基因进行异源表达、纯化、酶活性研究，结果表明FCH27_2751的酶活较强，命名为NasHac。酶学表征结果显示，该酶最适反应温度、NaCl浓度、pH分别为70℃、2M、9.0；对NaCl浓度、温度、pH均具有广适性；Fe3+、K+、乙醇、甘油和异丙醇对该酶具有促进作用。当NaNO3为底物时，NasHac的Vmax值为30.94μg/min/mg，Km值为1.64mM。NasHac对盐浓度、pH和温度有着良好的广适性，有望应用于腌制蔬菜中硝酸盐的降解。