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摘要目的探究非小细胞肺癌A549、H460细胞外泌体对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖、迁移侵袭能力的影响及其机制<br>　　方法培养A549、H460细胞，超速离心从细胞培养上清中提纯外泌体，利用动态光散射（DLS）粒径分析、透射电镜（TEM）和westernblot对提取的外泌体进行粒径、形态和特异性标志物的鉴定。将提取的A549、H460外泌体和HUVECs共培养，同时在共培养体系中加入PI3K抑制剂LY294002，使用transwell迁移和侵袭实验分别检测HUVECs迁移侵袭能力，CCK-8细胞增殖实验检测HUVECs增殖。提取与外泌体共培养后HUVEC细胞总蛋白，westernblot检测HUVECs中AKT、pAKT表达情况。<br>　　结果通过超速离心提取的非小细胞肺癌A549、H460细胞外泌体粒径分布主要在40-100nm左右，电镜下为“杯状结构”，外泌体标志蛋白CD63和TSG101在样本中存在表达。在迁移、侵袭实验中，A549、H460细胞外泌体增强HUVECs迁移侵袭能力，CCK-8实验结果也显示，外泌体提高了细胞增殖能力，且随外泌体浓度升高，对HUVECs迁移侵袭、增殖能力的提升越高，同时LY294002可以抑制外泌体对HUVECs的作用。Westernblot显示，A549、H460细胞外泌体可以提高HUVECs中AKT的磷酸化水平（pAKT/AKT），同样地，LY294002可以降低外泌体的作用。<br>　　结论本研究通过超速离心成功从非小细胞肺癌A549、H460细胞培养上清中提取到外泌体，且A549、H460外泌体能够提高HUVECs的迁移侵袭和增殖能力，同时提高细胞中AKT的磷酸化水平，而PI3K抑制剂LY294002能够逆转外泌体对HUVECs的作用。本研究结果提示，非小细胞肺癌外泌体可能通过内皮细胞中PI3K/AKT通路影响血管新生，进而在肿瘤转移中发挥作用。