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摘要目的：抑郁症（Majordepressivedisorder，MDD）是精神障碍最常见的疾病之一，目前MDD诊断仍主要依靠于症状学表现，缺乏客观有效的生物标志物，因此探讨抑郁症的发病机制，明确客观生物标志物对MDD的诊断和治疗尤为重要。随着人们对医学认识的提升，生物-心理-社会医学模式得到普遍的认同，表观遗传学或许是目前最有希望解释现代医学模式下疾病形成的机制，其中微小RNA（MicroRNA，miRNA）是表观遗传学修饰重要的组成之一，其作用机制为抑制靶向mRNA表达参与转录后调控，近年来越来越多的miRNA被发现与抑郁症相关。虽然已有研究发现一些血液来源miRNA有潜在的诊断能力，但miRNA组织来源复杂且容易被降解，其有效性仍有待探讨。外泌体是一种包含miRNA以及其他细胞生物信息的囊泡结构，几乎存在所有体液中，可以保护miRNA免受胞外酶类的降解，具有双层脂质结构可通过血-脑脊液屏障，这些功能决定了外泌体miRNA能够成为神经精神疾病具有潜力的生物学标志物。本课题组前期发现了血清外泌体miRNA在儿童青春期MDD患者中差异性表达，为进一步探索miRNA在中枢神经系统表达情况，本研究通过构建青春期小鼠抑郁模型，对脑组织外泌体（brain-derivedexosomes，BDEs）进行miRNA高通量测序，对差异miRNA表达谱进行生物信息学分析，并在脑组织水平验证差异miRNA表达情况，试图寻找MDD潜在的生物标志物。<br>　　方法：通过构建青春期慢性社交挫败应激（chronicsocialdefeatstressdepression，CSDS）小鼠模型，社交互动测试、旷场实验、糖水偏好实验评估小鼠抑郁样行为，收集小鼠脑组织。采用高速离心法提取BDEs，电子显微镜、纳米流式检测技术以及蛋白质印记法对外泌体形态、粒径大小和表面标志蛋白进行鉴定。高通量测序技术进行脑组织外泌体miRNA测序分析，对差异表达的miRNA进行靶基因预测及GO和KEGG富集分析，并对差异miRNA进行靶基因预测，构建蛋白互作网络。最后根据测序结果筛选目的miRNA，使用实时荧光定量PCR实验验证目的miRNA在抑郁小鼠脑组织内表达情况,将目的miRNA表达水平和行为学相关数据做相关性分析，并将差异表达的目的miRNA做生物信息学分析，预测靶基因并构建蛋白互作网络图。<br>　　结果：1、在青春期抑郁样行为小鼠BDEs中发现有17个差异表达的miRNAs（miR-210-5p、miR-143-5p、miR-574-5p等），其中13个miRNAs显著上调，4个miRNAs显著下调，信息学分析显示差异表达的miRNAs在PI3K?Akt信号通路、轴突导向以及缺氧反应等显著富集。对差异miRNA预测靶基因的PPI网络分析发现ATK1、DLG4、Ptpn11、Gdi1是关键蛋白。<br>　　2、青春期抑郁样行为小鼠海马组织miR-574-5p表达降低（Plt;0.05），且miR-574-5P表达水平和社交回避指数存在正相关关系，即miR-574-5P高表达与低社交回避相关，对miR-574-5p靶基因预测发现Trim65、Tyw3、Iffo2等关键基因。<br>　　结论：1、在青春期CSDS小鼠BDEs中差异表达的miRNA可能通过参与PI3K?Akt信号通路、神经可塑性、缺氧反应等生物过程调控大脑功能，从而产生抑郁样行为。<br>　　2、实验组小鼠大脑外泌体和海马组织中均发现了miR-574-5p的显著性差异表达，miR-574-5p可能是青春期抑郁症潜在的生物标志物。