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摘要目的：制备具有马尔堡病毒(Marburg virus, MARV)中和活性的单克隆抗体（monoclonal antibodies, mAb），为马尔堡病毒可能引发的大规模感染提供治疗性药物。<br>　　方法：将AF-03和MARV GP质粒利用瞬时转染CHO-S细胞，经过纯化后得到单抗AF-03和蛋白MARV GP，利用BCA定量法测定浓度，经SDS-PAGE鉴定纯度。通过VSV和HIV假病毒系统，评价抗体对MARV假病毒的中和作用。建立感染MARV假病毒的小鼠模型，在小鼠体内评价抗体的作用。通过计算机模建和分子对接获得抗体与GP相互作用的位点，将其进行点突变鉴定抗体表位。用岩藻糖基因敲除宿主细胞系CHOK1-AF表达单抗AF-04，经过糖型分析、ELISA、SDS-PAGE等实验鉴定，经过在NK细胞和Jurkat-CD16a-NFAT-Luc细胞活化实验验证与FcγRⅢ结合作用。<br>　　结果：（ 1 ）成功获得纯度较高的AF-03、AF-04及MARV GP。（ 2 ） AF-03体外评价中体现出较强的中和能力。（3）AF-03在MARV假病毒感染小鼠模型上显示良好的阻断作用。（ 4 ）通过分子对接预测AF-03的表位（ Q128-N129, Q204-T205-Q206, Y218, K222, C226）并通过结合和中和实验进行验证。（5）AF-03能阻止体外GP酶解的EBOV、SUDV和BDBV假病毒感染细胞。（6）AF-04具有更强的与FcγRⅢα的亲和力和激活NK细胞功能。<br>　　结论：AF-03在小鼠体内和细胞中均能有效抑制MARV假病毒进入宿主细胞，且对EBOV等假病毒有交叉中和作用；岩藻糖敲除的单克隆抗体AF-04 ADCC活性增强。