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摘要酸响应肽（pH low insertion peptides, pHLIPs）可以在酸性溶液中发生构象变化，C端嵌入在细胞膜内，N端展示在细胞膜外。根据这一特性，pHLIP为药物递送和靶向治疗提供了新的思路。程序性死亡受体 1（Programmed death 1, PD-1）是主要表达在活化T细胞表面的一种抑制性受体，可与PD-L1或者PD-L2配体结合并产生负性信号，抑制下游信号通路，从而抑制自身免疫病。PD-L1/PD-1对维持免疫稳态至关重要。因此，增强PD-L1/PD-1信号被认为是预防自身免疫性炎症和诱导免疫耐受的新策略。<br>　　目的：我们先前的研究将野生型pHLIP的N端与鼠源PD-L1的胞外段C端通过(G4S)3 连接子连接后得到重组融合蛋白PD-L1-pHLIP，并对其进行了功能评价。本次研究旨在进一步探究PD-L1-pHLIP在酸性溶液中的免疫抑制功能并用于治疗实验性肠炎。<br>　　方法：利用 ELISA和FACS比较PD-L1-pHLIP在微酸和强酸微环境中抑制T细胞的功能差异、检测PD-L1-pHLIP在各群免疫细胞上的插入性、DSS肠炎小鼠肠培养上清的细胞因子分泌、模型小鼠结肠组织乳酸含量和PD-L1-pHLIP抑制巨噬细胞产生TNF-α的作用。小动物活体成像检验PD-L1-pHLIP和pHLIP在病灶组织和其他器官中的富集。免疫组化检测SCL26A3的表达，HE病理染色观察小鼠结肠组织形态，免疫荧光检验PD-L1-pHLIP在炎症部位各细胞群上的插入状况。PD-L1-pHLIP（5mg/kg）腹腔注射评价其对DSS肠炎的治疗效果。<br>　　结果：（1）在pH6.1 (强酸)而不是pH6.8（微酸）环境中，PD-L1-pHLIP展现良好的免疫抑制功能；（2）在强酸或微酸环境中，PD-L1-pHLIP均能展示在多群免疫细胞膜上。相比于微酸条件，强酸条件下的PD-L1-pHLIP膜上丰度明显更高；（3）更高剂量的DSS诱导的肠炎病灶中的酸度明显更高；（4）PD-L1-pHLIP对3%DSS诱导的肠炎没有治疗作用，但对6%DSS诱导的肠炎小鼠能够延长其存活时间，减轻肠道损伤；（5）相比于3%DSS诱导的肠炎，PD-L1-pHLIP在6%DSS诱导的肠炎小鼠病灶中的富集程度更高，且在肠上皮细胞和多群免疫细胞上展示；（6）PD-L1-pHLIP治疗降低了病灶组织中的多个促炎因子的表达水平。同时给予PD-1抗体体内外中和，证明PD-L1-pHLIP通过PD-1信号通路抑制巨噬细胞分泌TNF-α。<br>　　结论：PD-L1-pHLIP蛋白在强酸而不是微酸条件下发挥免疫抑制功能和减轻实验性肠炎。