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摘要第一部分ERBB3调控肝母细胞瘤增增殖的分子机制研究<br>　　研究目的<br>　　肝母细胞瘤(Hepatoblastoma，HB)是儿童发病率最高的肝脏恶性肿瘤。研究证明，在2000-2015年间，肝母细胞瘤发病率每年显著增加。而随着精准外科技术的发展，肝母细胞瘤的预后良好。然而进展期的肝母细胞瘤患者预后仍不佳。近年来，人们对HB的分子机制有了更多的关注，也取得了很大进展，更好地了解导致肝母细胞瘤的分子机制对于早期发现和有效治疗是非常必要的。然而肝母细胞瘤的发病原因及发病机制仍为未知。ERBB3是表皮生长因子受体家族中的一员，在人生长发育过程中起到关键作用，近年来人们发现其与肿瘤发生发展有关键联系，然而其与肝母细胞瘤的关系仍未阐明。因此，本篇文章旨在探索ERBB3基因与肝母细胞瘤发病的潜在关系。<br>　　研究方法<br>　　我们应用免疫组化染色法对肝母细胞瘤肿瘤及瘤旁组织中ERBB3的蛋白表达进行检测，为了对ERBB3影响肝母细胞瘤细胞增殖进一步探讨，构建慢病毒介导的短发夹RNA（shRNA）载体来稳定敲低肝母细胞瘤细胞系HUH6、HepG2中ERBB3基因，接着进行CCK-8实验，克隆形成实验探究ERBB3对HB细胞增殖能力的影响，通过流式细胞实验，探究ERBB3对HB细胞凋亡的影响。接着使用shRNA对HepG2细胞系中的ERBB3基因过表达，重复表型实验反向验证。为求进一步探究ERBB3基因影响肝母细胞瘤增值的机制，对肝母细胞瘤细胞系ERBB3敲低组和对照组进行转录组测序，为了解其中的信号通路，将测序结果进行GO和KEGG分析，得到预测通路结果，再利用蛋白印迹实验对预测通路进行验证。<br>　　研究结果<br>　　1.本研究对45对肝母细胞瘤肿瘤及瘤旁组织进行ERBB3蛋白表达检测，发现肿瘤组织明显高于瘤旁组织。<br>　　2.体外实验，应用慢病毒载体介导的短发夹RNA在肝母细胞瘤细胞系（HUH6、HepG2）稳定敲低ERBB3基因，ERBB3表达下调后，肝母细胞瘤细胞增殖能力减弱，凋亡数目变多。同时shRNA稳定过表达HepG2细胞系ERBB3基因，表达上调后增值能力增强，凋亡减少。<br>　　3.综合分析细胞转录组测序结果，发现ERBB3可能通过Ras1/Raf信号通路影响细胞增殖。<br>　　4.利用免疫印记实验进一步验证，ERBB3通过Ras1/Raf信号通路调节肝母细胞瘤细胞增殖及凋亡过程。<br>　　结论<br>　　ERBB3可能作为肝母细胞瘤早期诊断的生物学标志物，帮助肝母细胞瘤分子治疗提供的新靶点。<br>　　第二部分海信计算机辅助手术系统在儿童原发性肝脏间叶肿瘤的应用<br>　　研究目的<br>　　肝脏间叶肿瘤是一类由纤维、脂肪和其他间叶细胞分化而来的良性和恶性肿瘤。其中肝脏错构瘤是一种良性间叶源性肝肿瘤,该肿瘤可恶化成为肝未分化肉瘤，使肿瘤恶性程度加剧。未分化胚胎性肉瘤是肝脏原发间叶源性肿瘤类别中发病率最高的恶性肿瘤，该肿瘤仅发生于肝脏。这两种间叶肿瘤都具备生长迅速、瘤体大的特点,，而最有效的治疗手段仍以手术切除为主。近年来随着数字医学技术的兴起和人体脏器三维可视化技术的临床应用，大大提升了外科手术的精准性和安全性。因此，本研究拟对海信计算机辅助手术系统的应用价值进行探讨。<br>　　研究方法<br>　　2009年4月至2020年11月在青岛大学附属医院小儿外科共收治肝脏间叶肿瘤8例，其中男童4例，女童4例；年龄为10个月至9岁，平均年龄4.5岁。其中4例患儿应用HisenseCAS将上腹部动态增强CT图像进行三维重建，对肿瘤大小位置、有无血管侵犯进行准确评估，判断肿瘤完整切除的可能性，制定手术规划。其余4例则按照常规手术流程进行手术。本研究中所有患儿术前均无化疗，将手术时间、术中出血量、生存率和术后随访等指标结合来评估应用HisenseCAS的安全性和可行性。<br>　　研究结果<br>　　8例均完整切除肿瘤，术中间肿瘤囊实性肿瘤突出肝脏表面呈外生性生长，体积巨大，将大部分腹腔占据，肿瘤皆为单发且包膜完整。其中3例位于肝中叶，3例位于肝左叶，2例位于肝右叶。肿瘤形状如类圆形5例，其余3例为不规则形。我们将应用HisenseCAS计算机辅助手术系统三维重建和未应用三维重建的手术结果进行对比。发现应用海信CAS系统行术前规划的病例，术中情况与预期一致，手术过程预见性较强。其中4例未行三维重建的患儿平均手术时间为183.5±43.7min，平均术中出血量为52.5±36.9ml，行三维重建的4例病例其平均手术时间约为170±46min,出血量平均为37.9±41.5mL。8例患儿随访至今均恢复良好，无瘤生存。<br>　　结论<br>　　海信计算机辅助手术系统（HisenseCAS）可对儿童肝脏原发性间叶肿瘤进行准确的术前评估，制定合理的手术方案，并实时精确地指导手术的实施。海信CAS的应用有利于提高肝脏切除手术的安全性和精确性，为儿童肝脏间叶肿瘤的切除计划提供依据，为提高患儿的长期生存率提供了可能。