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摘要目的：<br>　　本文旨在探讨SYK对AKT1的调控作用，以及对低侵袭性和高侵袭性乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及可能存在的分子机制。<br>　　方法：<br>　　（1）组织层面：①采用免疫组化技术检测人BRCA组织（9例）及对应的癌旁组织（9例）中SYK蛋白的表达情况；②通过大数据库分析SYK蛋白的表达水平与BRCA病人之间的预后相关性；③使用cBioPortal数据库分析在BRCA组织中SYK表达和AKT1表达之间的相关性。（2）细胞层面：①利用pEX-3质粒载体构建重组质粒pEX-3-SYK，转染至BRCA细胞（MCF-7和MDA-MB-231），使SYK过表达。具体分组情况如下：control组：不作任何处理的BRCA细胞；pEX-3-NC组：转染pEX-3空载体至BRCA细胞；pEX-3-SYK组：转染pEX-3-SYK至BRCA细胞。②应用Western blotting法检测正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、BT549和MDA-MB-231中SYK的蛋白表达水平， qRT-PCR法检测对应细胞中SYK的mRNA表达水平以及应用免疫荧光检测对应细胞中SYK的荧光强度。转染重组质粒后，通过Western blotting和qRT-PCR法检测转染效率。③ 应用 Western blotting检测过表达 SYK后 p-AKT1、AKT1、p-mTOR和mTOR以及EMT通路蛋白的表达变化；采用免疫荧光检测过表达SYK后AKT1的荧光强度变化。④PI/RNase染色法检测细胞周期分布情况。⑤伤口愈合实验检测细胞迁移能力。⑥Transwell实验检测细胞侵袭能力。⑦Annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡情况。<br>　　结果：<br>　　（ 1 ）与癌旁组织相比， SYK 蛋白在 BRCA 组织中的表达明显下调（P＜0.0001）；SYK蛋白高表达与BRCA患者总体生存时间延长有关（P＜0.05），但与不同分子分型的BRCA患者的生存预后没有显著相关性（P＞0.05）；在乳腺癌组织中，SYK表达与AKT1表达呈负相关，相关系数为-0.13（P＜0.01）。（2）与 MCF-10A细胞相比， SYK在 MCF-7、BT549和MDA-MB-231细胞中蛋白（ P＜0.01 ）和 mRNA的表达量均降低（ P＜0.0001 ）， SYK荧光强度也均较弱（P＜0.0001），但在MCF-7细胞中的表达水平较另外两种细胞高；将重组质粒转染至 MCF-7 和 MDA-MB-231 细胞后， SYK 蛋白（ P＜0.0001 ）和 mRNA （P＜0.001）表达量均显著升高，表明SYK过表达成功。在MCF-7细胞中，过表达 SYK 后 p-AKT1 和 AKT1 的表达水平均下调（ P＜0.05、P＜0.01 ），但 p-AKT1/AKT1的表达水平没有显著性差异（P＞0.05）。在MDA-MB-231细胞中，p-AKT1和p-AKT1/AKT1的表达水平均显著下调（P＜0.001、P＜0.01），但AKT1的表达水平没有显著性差异（ P＞0.05 ）。而p-mTOR和mTOR的表达均未受影响（P＞0.05）。免疫荧光结果显示，在两种细胞中过表达SYK后AKT1的荧光强度均显著减弱（P＜0.0001）。从生物学角度来看，过表达SYK导致BRCA细胞迁移能力下降（P＜0.0001），细胞侵袭能力下降（P＜0.001），促进MDA-MB-231细胞凋亡增加（P＜0.01），细胞周期S期阻滞明显增强（P＜0.01）；但是对MCF-7细胞的凋亡和增殖情况没有显著影响（P＞0.05）。此外，过表达SYK可以影响EMT通路， E-Cadherin表达均上调（ P＜0.0001 ）， N-Cadherin表达均下调（ P＜0.01 ， P＜0.0001），其中在MCF-7细胞中，Vimentin表达下调（P＜0.0001）、β-catenin的表达无显著性变化（ P＞0.05 ），在 MDA-MB-231细胞中，β-catenin表达下调（P＜0.0001）、Vimentin的表达无显著性变化（P＞0.05）。<br>　　结论：<br>　　1、在BRCA细胞中，SYK参与调控AKT1及其相关信号通路；<br>　　2、过表达SYK对低侵袭性和高侵袭性BRCA细胞的迁移和侵袭均有抑制作用，且对后者的抑制作用更强，对EMT通路蛋白的检测结果也证实了这一生物学现象；<br>　　3、过表达SYK促进了高侵袭性BRCA细胞的凋亡，抑制了细胞的增殖，但对低侵袭性BRCA细胞的生长和存活没有显著性影响。