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摘要肺癌是我国最常见、死因居第一位的恶性肿瘤。非小细胞肺癌（NSCLC）占所有肺癌病例的80%~85%。放射治疗是NSCLC综合治疗中不可或缺的部分，然而在临床治疗中，部分患者会出现放射抵抗现象，导致肺癌的局部复发甚至整个放疗的失败。因此，探索NSCLC放射抵抗机制，提高肺癌的放疗敏感性，对于肺癌的临床治疗将产生重要影响。<br>　　本课题组前期建立了X射线抵抗肺癌细胞株，通过转录组测序筛选差异表达基因，共鉴定到上调基因207个，下调基因137个。其中，RSPOs家族成员之一的RSPO3在X射线抗性株中显著下调，引起了我们的研究关注。RSPOs家族成员有着相似的结构，广泛参与调控多种生物学功能，包括血管新生，骨骼增长，生殖系统、呼吸系统和消化系统的发育等。此外，研究发现RSPO3可以通过Wnt/β-catenin信号通路参与包括肺癌在内的多种恶性肿瘤的发生。而Wnt通路能够通过调节细胞周期，DNA损伤修复，细胞凋亡等过程参与细胞辐射抗性的调节。目前，对RSPO3参与调控细胞辐射抗性的机制仍知之甚少。<br>　　前期研究已经证实RSPO3在X射线射抗性肺癌细胞株中表达下调，为了探究其异常表达的分子机制，我们从转录水平分析了其调控机制。首先利用生物信息学手段，预测了可以调控RSPO3的上游转录因子，然后通过表达相关性、q-PCR及双荧光素酶报告基因实验验证，确认转录因子FOXP3能够调节RSPO3的表达。FOXP3是转录因子叉头蛋白家族的一员，是调节性T细胞(Treg)发育和功能的主要调节因子。FOXP3的异常表达可能会导致人体的自身免疫疾病。FOXP3在多种恶性肿瘤中均有表达，但表达情况及功能作用各有不同。FOXP3在不同的肿瘤中分别扮演着促癌和抑癌两种截然不同的角色。作为转录因子，FOXP3对肿瘤发生的调控作用研究日益深入，而对于肿瘤细胞的放射抵抗机制研究较少。<br>　　本文以RSPO3与NSCLC的放射抵抗为出发点，探索其上游的转录调控机制，并对所预测的转录因子FOXP3与NSCLC的放射抵抗相关机制展开研究，为NSCLC的放射治疗提供一定的理论依据。<br>　　本论文主要研究结果如下：<br>　　（1）利用生物信息学手段分析RSPO3上游转录调控机制；分析了候选转录因子的生物学功能及临床相关性；<br>　　（2）mRNA水平及蛋白水平验证了FOXP3与RSPO3的表达相关性，根据预测的结合位点，设计位点突变，通过双荧光素酶报告基因实验验证了FOXP3与RSPO3的转录调控关系及结合位点；<br>　　（3）细胞功能学实验验证了FOXP3通过RSPO3参与调控NSCLC辐射抗性。