摘要目的:本文以构树叶药材为研究对象,从来源、性状、显微、薄层鉴别,水分、总灰分、酸不溶性及浸出物检查项进行测定,对总黄酮、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷及无机元素的含量开展研究,构建指纹图谱共有模式。对不同采收期的构树叶进行多指标综合分析,可以确定构树叶的最佳采收期,为其合理采收提供科学依据。对不同产地构树叶的化学质量综合评价,以期建立构树叶药材的质量标准草案。<br> 方法:采样时记录日期、海拔、经纬度、生态环境及植物特征,为后期实验中的一系列研究结果提供参考,建立相关联系。从构树叶药材的外观性状、显微鉴别、不同检查项进行测定分析。首先通过表面特征、质地、气味等对构树叶的性状进行观察;使用光学显微镜对不同批次构树叶的叶柄、叶片、粉末进行分析观察;扫描电子显微镜对构树雌株、雄株的叶片上下表面,叶、叶柄横切以及兰考杂交构树叶特征进行分析总结其特征点和差异性分析。记录不同采收期样品的鲜重和干重,计算折干率。参照2020年版《中国药典》附录中水分(烘干法)、总灰分、酸不溶性及醇溶性浸出物测定方法,对不同采收期、不同产地不同来源的构树叶药材进行测定。采用高效液相色谱法(HPLC)和分光光度计法测定36批次不同采收期、33批不同产地不同来源的构树叶药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷及总黄酮的含量。通过单因素试验,以超声时间、甲醇浓度、料液比为影响因素;以新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷五个指标成分总得率为评价指标,根据响应面分析法确定构树叶的最佳提取工艺。采用HPLC对构树叶样品的五个指标性成分进行含量测定。紫外分光光度计法对构树叶样品的总黄酮含量进行测定分析。应用高效液相色谱法(HPLC)建立构树叶指纹图谱,标定共有峰,指认已知化合物,计算所有样品的相似度。使用ICP-MS对采集于不同产地及不同采收期的构树叶样品中无机元素进行测定,对含量进行分析比较。<br> 结果:不同采收期构树叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷的含量范围分别为0.12~0.41%,0.11~1.02%,0.10~0.24%,0.33~1.58%,0.29~0.92%。绿原酸、木犀草苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷的含量有较大差异性,新绿原酸、隐绿原酸含量差异性较小。构树叶药材水分、总灰分、酸不溶性灰分的平均值分别为 8.22%、16.02%、2.90%,浸出物含量平均值为26.63%。随着植物的生长,九月中旬开始酸不溶性灰分和浸出物含量逐步提升,表明采收时间与其有一定关系。河南地区不同产地的构树叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷的含量范围分别 0.02~0.38%, 0.03~0.44%,0.02~0.31%,0.22~1.05%,0.27~0.75%,由五个指标成分含量可知,不同批次之间的差异倍数分别达到19、15、16、5、3倍,以新绿原酸含量的差异最为显著,绿原酸和隐绿原酸次之。构树叶药材水分、总灰分、酸不溶性灰分的平均值分别为 9.72%、16.10%、2.90%,浸出物含量平均值为24.97%。建立了共有模式指纹图谱,标定17个共有峰,指认出6个成分。对所有样品的无机元素进行PCA分析。<br> 结论:构树叶应于夏季叶成熟时采收,质量标准草案中将标准定为水分不得过12.0%,总灰分不得过20.0%,酸不溶性总灰分不得过3.5%,浸出物不得少于20.0%,木犀草苷含量不得少于0.50%,芹菜素-7-0-葡萄糖醛酸苷(C21H18O11)含量不得少于0.35%。构树叶质量标准的制定为质量控制和临床应用提供了合理的参考依据。
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