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摘要结直肠癌(Colorectal cancer, CRC)是全球癌症死亡的第二大常见原因，预计到 2035 年，全球结直肠癌的发病例数将增加到 2500万例。遗传和环境因素在结肠癌的发生发展中扮演重要角色，不良的生活习惯如肥胖，吸烟，缺乏体育锻炼等都会增加患结肠癌的风险；尽管目前结直肠癌的筛查手段不断更新以及优化，在一定程度上提高了结肠癌患者的诊断率，但对于已经确诊并且发生远处转移的结肠癌患者，生存期及预后并没有得到明显改善，因此亟需我们去深入探究结肠癌发生发展的分子机制，寻找其潜在的治疗靶点，探索其与现有的临床药物联合使用来达到最好的治疗效果，从而提高结肠癌患者的生存。<br>　　前胶原-赖氨酸2-氧代戊二酸5-双加氧酶（PLODs）的突变和过表达促进了多种恶性肿瘤的发生和转移。PLODs有三种异构体(PLOD1、PLOD2和PLOD3)，其中前胶原-赖氨酸，2-氧戊二酸-5-双加氧酶3（PLOD3）是一种多功能酶，具有赖氨酸羟化酶活性、胶原半乳糖基转移酶活性和葡萄糖基转移酶活性。研究表明PLOD3的异常表达与肺癌、肝细胞癌、胃癌的不良预后相关。然而，PLOD3在结直肠癌中的表达模式和作用机制尚不清楚。<br>　　本研究首先通过生物信息学分析发现：与癌旁组织相比，PLOD3 不仅在结直肠癌组织中高表达，而且在肝脏转移灶中的表达量也明显升高，随后通过qPCR、Western Blot 以及免疫组化等技术对结肠癌患者的肿瘤组织及癌旁组织中PLOD3的表达量进行了检测，同样发现PLOD3在结直肠癌组织中显著高表达，这提示 PLOD3 在结直肠癌的发生、发展过程中可能发挥了重要的作用。因此，我们构建了PLOD3敲低以及过表达的结直肠癌细胞稳转株，对PLOD3在结直肠癌中增殖和转移的功能进行了研究。CCK-8、活细胞计数以及克隆形成等实验均表明PLOD3敲低的结直肠癌细胞增殖能力受到了明显抑制。流式细胞术分析发现PLOD3敲低后，G2/M期肿瘤细胞显著增多，而细胞凋亡却没有显著差异，这提示 PLOD3 主要是通过调控细胞周期从而促进结直肠癌细胞增殖。此外， Transwell实验证实了PLOD3敲低后抑制了细胞迁移以及侵袭能力。最后，通过构建小鼠皮下瘤和肝脏转移模型探究PLOD3在体内对结直肠癌细胞生长以及转移的影响。结果发现，敲低PLOD3后，小鼠的皮下肿瘤明显减小并且转移至肝脏的肿瘤数目显著降低。通过流式细胞术对于肿瘤微环境中的免疫细胞进行分析，发现 PLOD3 的表达水平与 CD8+T 细胞(r=-0.314)的浸润呈负相关。为进一步明确PLOD3调控结直肠癌增殖及转移的分子机制，我们将PLOD3敲低后使用RNAseq进行测序分析，发现PLOD3 对NF-κB/TNF α信号通路具有显著的调控作用，通过 Western Blot、免疫荧光以及荧光素酶报告基因实验进一步证实PLOD3可通过NF-κB/TNF α通路调控结肠癌的发生、发展。综上所述，PLOD3在结肠癌发生、发展过程中扮演原癌基因的角色，或可成为治疗结直肠癌的靶点。