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摘要[目的]胃癌是世界上最主要的癌症死亡原因之一。课题组前期通过定量蛋白质组学技术，筛选获得胃粘膜癌变相关差异表达蛋白质丝氨酸蛋白酶1（PRSS1），并证实PRSS1在胃癌组织中高表达，其表达与胃癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移呈正相关。本研究旨在明确PRSS1在胃癌细胞中的表达调控机制。<br>　　[方法]1、采用qPCR实验检测PRSS1在胃癌细胞系中的表达情况。2、采用生物信息学结合前期芯片结果，分析靶向调节PRSS1的miR-873-3p，经qPCR检测miR-873-3p在胃癌细胞系中的表达情况。3、构建PRSS1的双荧光素酶野生型载体和突变型载体，双荧光素酶实验检测miR-873-3p与PRSS13’-UTR靶向结合情况。4、Westernblot实验和qPCR检测miR-873-3p表达对PRSS1蛋白和mRNA表达的影响。5、运用EdU实验、细胞划痕实验与Transwell迁移侵袭实验，观察miR-873-3p表达对胃癌细胞MGC803和BGC823增殖、迁移和侵袭的影响。6、Westernblot实验检测miR-873-3p表达后对EMT相关分子（E-cadherin和Vimentin）表达的影响。7、生物信息学结合前期芯片结果，分析能竞争性结合miR-873-3p的circRNA，经qPCR实验检测circRNA在胃癌细胞系中表达情况。<br>　　[结果]1、qPCR实验检测结果显示，与永生化胃粘膜上皮细胞GES-1相比，PRSS1在胃癌BGC823、MGC803和SGC7901细胞中表达明显升高（P＜0.05）。2、生物信息学分析发现，miR-873-3p与PRSS13’-UTR靶向结合可能性最大。qPCR实验检测结果显示，与永生化胃粘膜上皮细胞GES-1相比，miR-873-3p在BGC823、MGC803和SGC7901细胞中表达明显降低（P＜0.05）。3、双荧光素酶实验结果显示，与野生组共转染mimicsNC相比，野生组中共转染过表达miR-873-3p的荧光素酶比值降低，（P＜0.05)，而突变组中共转染过表达miR-873-3p的荧光素酶比值没有差异，结果表明，miR-873-3p可与PRSS1的3’-UTR结合。4、Westernblot结果显示，与miR-873-3pNC相比，导入miR-873-3pmimics后，PRSS1蛋白表达量降低，而导入miR-873-3pinhibitor后PRSS1蛋白表达量增高（P＜0.05），结果表明，miR-873-3p可抑制胃癌MGC803和BGC823细胞中PRSS1的表达。5、EdU、细胞划痕实验与Transwell迁移侵袭实验结果显示，miR-873-3p过表达，MGC803和BGC823细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的能力降低，而miR-873-3p低表达后，MGC803和BGC823细胞增殖、迁移、侵袭和EMT能力增加（P＜0.05）。6、Westernblot结果显示，与miR-873-3pNC相比，导入miR-873-3pmimics后，Vimentin蛋白表达量降低，而E-cadherin蛋白表达量增加（P＜0.05），而导入miR-873-3pinhibitor后，Vimentin蛋白表达量增加，而E-cadherin蛋白表达量降低（P＜0.05）。结果表明，miR-873-3p使MGC803和BGC823细胞的EMT能力减弱（P＜0.05）。7、生物信息学分析发现，circNOX4可与miR-873-3p竞争力性相互作用。qPCR结果显示，与GES-1相比，circNOX4在BGC823、MGC803和SGC7901细胞中高表达（P＜0.05）。<br>　　[结论]1、miR-873-3p靶向调控PRSS1表达，抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。<br>　　2、circNOX4在胃癌细胞中高表达，其可能与miR-873-3p竞争性结合。