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摘要目的：观察烟酰胺单核苷酸（Nicotinamide mononucleotide，NMN）对链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）诱导的糖尿病（Diabetes mellitus，DM）小鼠生精障碍的保护作用，探讨并初步阐释NMN通过调控支持细胞（Sertoli cells，SCs）糖酵解进而改善DM小鼠生精障碍的作用机制。<br>　　方法：腹腔注射STZ诱导DM小鼠模型。造模成功后，给予NMN （500mg/kg）干预8周。处死后，采用附睾精液涂片评估NMN对DM小鼠精子数量及畸形率的改善作用；苏木精/伊红染色（Hematoxylin-eosin，HE）观察NMN对DM小鼠附睾内精子数量及睾丸组织形态学的影响；采用实时荧光定量 PCR （Quantitative real-time PCR，qRT-PCR）及免疫组织化学方法（Immunohistochemistry，IHC）检测小鼠睾丸组织抑凋亡因子Bcl-2、促凋亡因子 Bax的表达。采用 IHC 法检测睾丸 SCs 骨架蛋白Vimentin的蛋白表达， qRT-PCR法检测睾丸SCs标志基因WT1、GATA4的表达；采用qRT-PCR、IHC及Western blot法检测睾丸糖酵解关键酶HK2、PKM2、LDHA的表达，应用乳酸及丙酮酸检测试剂盒测定睾丸中乳酸、丙酮酸含量。随后建立高糖（High glucose HG）诱导TM4细胞损伤模型，同时添加NMN干预48 h。CCK-8法检测细胞活力；采用qRT-PCR及Western blot法检测TM4细胞Bcl-2、Bax的表达。采用qRT-PCR法检测TM4细胞SCs标志基因WT1、GATA4的表达，qRT-PCR、Western blot法检测TM4细胞糖酵解关键酶HK2、PKM2、LDHA的表达，应用乳酸及丙酮酸检测试剂盒测定细胞上清液中乳酸、丙酮酸含量。<br>　　结果：与对照组（Ctrl组）相比，DM小鼠睾丸重量明显降低。附睾精液涂片结果显示DM小鼠精子数量显著降低，畸形率显著升高。HE染色结果发现，DM小鼠附睾管腔内少量精子，生精上皮明显损伤，生精细胞层数减少至3~4层，生精细胞排列紊乱，精原细胞及初级精母细胞数量减少，生精小管直径及面积显著减小。qRT-PCR及IHC结果表明，DM小鼠睾丸抑凋亡因子Bcl-2基因及蛋白表达水平显著下调，促凋亡因子Bax基因和蛋白的表达水平显著上调。NMN干预后，睾丸生精上皮损伤减轻，接近Ctrl组，睾丸细胞凋亡减少，精子生成增多。IHC结果表明，与Ctrl组相比， DM小鼠生精小管中Vimentin呈分散、断裂的表达，Vimentin阳性细胞数量明显减少。qRT-PCR结果显示，DM小鼠支持细胞标志基因WT1、GATA4表达显著降低。NMN干预后，Vimentin阳性细胞数量明显增多，WT1、GATA4基因表达水平显著上调。此外，qRT-PCR、免疫组化及Western blot结果均显示，糖酵解相关限速酶HK2、PKM2、LDHA在DM小鼠睾丸中的表达显著下调。乳酸及丙酮酸含量测定结果显示，DM小鼠睾丸乳酸含量减少，丙酮酸蓄积增多。NMN干预后，糖酵解相关限速酶HK2、PKM2、LDHA的表达水平显著升高，睾丸乳酸含量增多，丙酮酸蓄积减少。CCK-8检测结果发现，在体外培养的TM4细胞中，添加HG可抑制细胞活力， NMN处理显著提高了暴露于HG的细胞活力。qRT-PCR及Western blot结果显示，HG促使TM4细胞Bcl-2基因和蛋白表达显著降低，Bax基因和蛋白表达显著升高。NMN处理逆转了HG诱导的TM4细胞凋亡。qRT-PCR结果表明，HG处理后TM4细胞中WT1、GATA4基因的表达显著降低；qRT-PCR、Western blot结果表明，HG促使TM4细胞中HK2、PKM2、LDHA表达显著降低。此外，添加HG后， TM4细胞的乳酸产量下降，丙酮酸蓄积增多。NMN处理后，TM4细胞WT1、GATA4、HK2、PKM2及LDHA的表达水平均显著上调，乳酸产量增多，丙酮酸蓄积减少。<br>　　结论：NMN对STZ诱导的DM小鼠生精功能障碍具有改善作用，其机制可能是通过促进SCs糖酵解代谢通路从而抑制生殖细胞凋亡实现的。