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摘要眼睛是人类感知外界环境的主要器官，其中，由角膜上皮层和结膜构成的角结膜眼表发挥着保护眼球和屈光的重要作用。但角结膜眼表易受外伤（如化学伤）和变性疾病（如翼状胬肉）引发的炎症性损伤。目前，临床中已有多种用于角结膜眼表重建的材料（如自体/异体结膜、羊膜、脱细胞结膜、天然生物高分子和合成高分子材料等），但临床治疗效果有限。究其原因，不仅是因为这些材料存在制备困难、力学强度不佳和疾病传播风险等缺点，更重要的是因为这些材料并未针对角结膜眼表的不同损伤病因和组织修复特点进行设计，且未采取配套的重建手术方法。<br>　　理想的角结膜眼表重建材料，应适配角膜上皮层和结膜在解剖学与病理学方面的特点，针对两者不同的损伤病因和修复特点，分别进行设计构建。同时，开发配套的重建手术方法，激发材料发挥功能，避免传统侵入性缝合手术操作对组织造成的并发症，是进一步提高重建效果有力解决临床痛点的创新方法。近年来，胶原蛋白（Collagen）基修复材料在生物材料和组织修复领域受到了广泛关注，来源于生物的天然大分子胶原蛋白，拥有令人满意的组织相容性、生物降解性和促修复性能，使其在眼表修复领域同样拥有广阔的应用前景。因此，本文从临床需求出发，以材料的实际应用为导向，分别针对角膜上皮层和结膜的生理结构、损伤病因和修复特点，以胶原蛋白为基材，制备胶原蛋白角结膜眼表重建补片并构建配套的重建手术技术。目的是实现角结膜眼表结构和功能的再生修复，并为临床实践提供创新性的研究思路和可行的应用材料。<br>　　在本文中，通过改进乳化交联法将基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases, MMPs）特异性抑制剂多西环素（Doxycycline, Dox）包裹在羟丙基壳聚糖微球（Hydroxypropyl chitosan microspheres, HCM）中，目的是保证缓慢释放的 Dox 能持续抑制 MMPs 的异常活性，抑制炎症并促进上皮细胞再生和稳定。然后创新性地联合HCM与胶原蛋白膜，制备具有抑制 MMPs 能力的载药胶原蛋白角膜重建补片。该重建补片可被缝合遮盖于受损的角膜，在保证药物原位释放的同时也能创造有利于再上皮化的微环境。实验结果表明，将微球负载后进一步延长了药物缓释时间至 10 天，且未改变胶原蛋白薄膜的基本理化性能。经细胞实验证实该重建补片具有良好的生物相容性和促细胞生长能力。随后，通过构建合适的体内外炎症模型，验证了该重建补片在炎症环境中能有效下调MMP-9 和-13 的信使核糖核酸（Messenger RNA, mRNA）表达水平。在新西兰白兔角膜碱烧伤模型中，通过缝合遮盖眼表的重建方式，重建补片加速角膜在3天内完成再上皮化过程，促进了上皮层的早期重建，并且上皮层在7天内终保持完整。同时，重建补片在第7天完全降解脱落，与角膜上皮层的再生修复进程相匹配。结果表明，载药胶原蛋白角膜重建补片安全有效，具有良好的临床应用价值。<br>　　另一方面，由于结膜在翼状胬肉术后重建过程中，易发生瘢痕修复和缝线相关并发症。因此，本文通过优化和筛选制备方法得到了具有天然组织结构和合适机械强度的胶原蛋白结膜重建补片。经体外细胞相容性相关实验验证后，进一步制作新西兰白兔眼结膜大缺损模型，并使用胶原蛋白结膜重建补片进行了结膜缝合重建手术。结果表明胶原蛋白重建补片在体内可明显提高结膜细胞的迁移能力、加速切口的早期闭合并促进组织早期的功能性修复。由于术后观察发现手术缝线将导致结膜组织发生明显的瘢痕并发症，因此本文随后创新性地采取无缝线手术思路，利用组织和胶原蛋白的天然反应位点，构建了基于半互穿网络（semi-Interpenetrating polymer network, sIPN）的可光固化生物胶水（GMO），并联合胶原蛋白结膜重建补片实现了结膜无缝线重建策略。通过调整甲基丙烯酰化明胶（Methylpropenyl acylated gelatin, GelMa）和氧化透明质酸（Oxidized hyaluronic acid, OHA）两组分的比例得到了合适的 GMO生物胶水配方。通过自建的个性化粘附测试平台，证实了 GMO 生物胶水的良好粘附性能。在体内，GMO 生物胶水不仅促进了结膜大缺损的早期闭合。更重要的是，胶原蛋白结膜重建补片联合生物胶水这一无缝线重建策略避有效地免了缝线相关并发症，实现了组织无瘢痕的功能性修复，展现了其良好的临床应用潜力。