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青春期母本存在对小鼠认知能力及海马齿状回神经发生的影响

摘要个体发育早期是大脑发育的关键时期,丰富的社会环境有利于个体的认知能力发育和成体神经发生,尤其在婴幼儿时期。青春期同样是大脑发育的关键时期,同样容易受到环境的影响,然而青春期社会环境对个体认知能力及神经发生的影响,却知之甚少。本研究以昆明小鼠为动物模型,通过行为学、免疫组织化学、蛋白质免疫印迹和酶联免疫反应等手段,探究了青春期母本存在对子代雌雄小鼠成年后认知能力、相关脑区RNA组学及神经发生的影响。主要结果如下:<br>  1. 青春期仍旧存在不同程度的母本行为。哺乳行为的时间及频率在21日龄后不断减少,在 24日龄后完全消失;与子代进行身体接触的频率在 24日龄最高,时间在27日龄时最高;舔舐子代的时间在27日龄最高,频率在30日龄最高,筑巢行为时间及频率在21日龄时最高,青春期均持续存在。<br>  2. 青春期母本存在显著提高了子代小鼠的认知能力。预实验中,D35 组雌雄小鼠在社会识别实验中形成了良好的短期社会记忆;新物体识别实验中 D35组雌雄小鼠识别指数高于其他组别;正式实验中,D35 组雌雄小鼠在新物体识别、目标定位识别、时间顺序识别实验中识别指数大于 D21组雌雄小鼠,更倾向于探究新的物体。<br>  3. 青春期母本存在显著降低了小鼠的焦虑水平。D35 组雌雄小鼠在旷场实验中在中心区域的时间多于在边缘区域;在明暗箱实验中,在明箱区域的时间显著多于暗箱;D35 组雌雄小鼠血清肾上腺素(Epinephrine,EPI)和皮质酮(Corticosterone,CORT)含量显著低于D21组。<br>  4. 青春期母本存在显著影响成体神经发生相关脑区的基因表达。分析显示雄性小鼠 DG中差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)共 641个,其功能可能与细胞紧密连接有关(GO分析主要富集于细胞骨架反应;KEGG在细胞跨膜转运、细胞紧密联系等通路显著富集);蛋白质-蛋白质互作网络(PPI)分析得出的 Hub基因为:Cldn3,Tjp3,Marveld3(下调)。雌性小鼠 DG中 DEGs共1210 个,其功能可能与神经细胞增殖有关(GO 分析主要富集于细胞骨架、神经活性受体配体相互作用反应;KEGG 在神经活性受体与配体相互作用、cAMP 信号通路、钙离子信号通路等通路显著富集);PPI 分析得出的 Hub基因为:Npy, Crh,Crhr2,Pdyn(上调);Fos,Cck,Calca(下调)。雄性小鼠Amy中DEGs共723个,其功能可能与细胞跨膜转运蛋白有关(GO分析主要富集于蛋白质降解和吞噬、物质跨膜运输等反应;KEGG 在神经活性受体配体相互作用、矿物质吸收等通路显著富集);PPI 分析得出的 Hub 基因为:Gnb3,Gng11,Gng8(上调);雌性小鼠Amy中DEGs共614个,其功能可能与性腺激素和肾上腺激素分泌、细胞增殖有关(GO 分析主要富集于细胞因子相互作用、神经活性受体配体相互作用、物质跨膜运输等反应;KEGG 在促肾上腺素释放、GABA 能突触等通路显著富集);PPI分析得出的Hub基因为:Pomc,Pmch,Trh,Ucn(上调)。<br>  5. 青春期母本存在显著提高了小鼠的成体神经发生水平。D35 组雌雄小鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)阳性细胞数量显著高于 D21 组;D35 组雄性小鼠双皮质素(Doublecortin,DCX)阳性细胞数量显著高于D21组。Western Blot实验中,D35组雌雄小鼠DG中DCX和BDNF表达显著高于D21组,D35组雄性小鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)表达显著高于 D21 组。D35 组雌性小鼠雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达显著高于 D21组。<br>  综上,青春期母本存在显著提高了小鼠认知能力和情绪表达,影响了小鼠海马齿状回差异基因表达,尤其是雌性;显著提高了海马齿状回的神经发生水平。可见,青春期母本存在对子代神经和行为发育具有积极的影响。

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