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免疫蛋白酶体亚基PSMB10诱导急性髓系白血病细胞衰老抵抗

摘要目的:我们发现化疗后不衰老急性髓系白血病(Acutemyeloidleukemia,AML)干细胞高表达免疫蛋白酶体亚基PSMB10(Proteasome20Ssubunitbeta10),为明确它的临床意义与功能,本研究拟:1.检测PSMB10在AML原代细胞与细胞系中的表达水平并分析其预后价值;2.体外研究PSMB10是否具有充当AML衰老调控分子的未知功能。<br>  方法:1.通过线上数据库分析PSMB10在AML患者和正常对照的单个核细胞及CD34+细胞中的表达差异及与生存的相关性;2.收集AML患者和健康对照骨髓标本,磁珠分选CD34+细胞群,qPCR检测PSMB10mRNA表达水平;3.体外电穿孔转染siRNA下调AML细胞系(KG1a和THP-1)的PSMB10表达,分别于转染后不同时间点利用qPCR和Westernblot检测PSMB10和衰老相关标志分子的mRNA和蛋白水平,利用EdU检测细胞增殖,PI法检测细胞周期,并流式细胞学检测衰老相关的β-半乳糖苷酶活性等指标评估AML细胞衰老水平变化。<br>  结果:1.数据库分析显示PSMB10在AML患者单个核细胞和CD34+细胞中的表达水平均高于正常对照,且在M5型急性单核细胞白血病中显著高表达,并与不良生存相关;2.PSMB10在初治AML原代骨髓标本CD34+细胞群中表达增高;3.下调KG1a和THP-1细胞系中的PSMB10表达可抑制细胞增殖,诱导G0/G1周期阻滞,增加衰老相关的β-半乳糖苷酶活性,以及增加衰老相关信号分子的序贯表达。<br>  结论:PSMB10在AML细胞及富集白血病干细胞的CD34+细胞中异常高表达,且与不良生存相关;下调PSMB10可体外诱导AML细胞衰老,为靶向诱导AML细胞衰老促进AML根治提供新线索。

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