摘要目的:<br> 通过检测妊娠期糖尿病(GestationalDiabetesMellitus,GDM)孕妇和糖耐量正常(NormalGlucoseTolerance,NGT)孕妇蜕膜组织中维生素D相关代谢基因的表达情况和甲基化程度,探讨蜕膜组织维生素D相关代谢基因在GDM发生发展中的作用,为维生素D防治GDM提供依据。<br> 方法:<br> 随机选择在河北省人民医院行择期剖宫产终止妊娠的足月单胎孕妇为研究对象,收集患者一般资料,依据孕期产检口服葡萄糖耐量试验结果将其分为GDM组和NGT组,用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)法检测25-羟基维生素D3-1-α-羟化酶(CytochromeP45027B1,CYP27B1)、维生素D受体(VitaminDReceptor,VDR)、25-羟基维生素D3-24-羟化酶(CytochromeP45024A1,CYP24A1)在蜕膜组织的表达位置、用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RealTimeQuantitativePCR,RT-qPCR)技术和蛋白免疫印迹(WesternBlot,WB)法检测维生素D相关代谢基因的表达水平,用甲基化特异性PCR(MethylmionSpecificPCR,MSP)法检测维生素D相关代谢基因的甲基化情况。<br> 结果:<br> 1.GDM组孕妇的空腹血糖(5.12±0.36mmol/Lvs.4.54±0.28mmol/L,Plt;0.01)、1小时血糖(9.34±2.18mmol/Lvs.7.42±1.08mmol/L,Plt;0.05)、2小时血糖(8.24±1.46mmol/Lvs.6.25±0.79mmol/L,Plt;0.01)、随机空腹血糖(5.29±0.69mmol/Lvs.4.34±0.43mmol/L,Plt;0.01)、糖化血红蛋白(5.4(5.3,5.58)vs.5.2(4.9,5.3),Plt;0.01)均显著高于NGT组,差异具有统计学意义;而GDM组孕中期维生素D水平(11.92±3.60ng/mlvs.18.58±5.75ng/ml,P<0.01)显著低于NGT组,差异具有统计学意义。<br> 2.免疫组化结果显示蜕膜组织中有维生素D相关代谢基因的蛋白表达,通过Fiji软件计算光密度(Opticaldensity,OD)值结果显示,GDM组CYP27B1水平(0.079±0.0027vs.0.093±0.013,P<0.01)明显低于NGT组,GDM组VDR水平(0.10±0.012vs.0.093±0.011,P<0.05)和CYP24A1水平(0.080±0.0029vs.0.078±0.0022,P<0.05)均明显高于NGT组。<br> 3.GDM组蜕膜组织中CYP27B1mRNA(0.75±0.28vs.1.07±0.40,P<0.05)表达低于NGT组,而GDM组蜕膜组织中VDRmRNA(1.68±0.20vs.1.20±0.73,P<0.05)和CYP24A1mRNA(2.46±1.44vs.1.35±0.86,P<0.05)表达均高于NGT组。<br> 4.GDM组蜕膜组织CYP27B1蛋白相对表达量(0.84±0.35vs.1.28±0.36,P<0.01)明显低于NGT组,而GDM组蜕膜组织VDR蛋白(1.39±0.81vs.0.73±0.42,P<0.05)和CYP24A1蛋白(0.87±0.26vs.0.55±0.16,P<0.01)相对表达量均明显高于NGT组。<br> 5.两组蜕膜组织中CYP27B1基因、VDR基因和CYP24A1基因甲基化率无明显差异。<br> 结论:<br> 1.维生素D代谢基因在蜕膜组织中参与GDM的发病,推测GDM患者维生素D水平降低与蜕膜组织中CYP24A1表达升高和CYP27B1表达降低有关。<br> 2.GDM患者蜕膜组织通过增加VDR表达来提高维生素D的生物利用率。<br> 3.维生素D相关代谢基因甲基化与妊娠期糖尿病无明显相关。
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