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摘要研究背景：<br>　　功能良好的子宫内膜、发育潜能正常的胚胎及两者之间的同步性是获得妊娠的基本条件。胚胎体外培养技术和胚胎植入前遗传学诊断解决了胚胎质量的问题，如何提高子宫内膜容受性是目前辅助生殖技术（Assistedreproductivetechnology，ART）重点要攻克的难题。<br>　　子宫内膜微刺激术（Endometriallocalinjury，ELI）被研究者们认为是改善子宫内膜容受性的重要方法之一，最早在1907年由Lobe等的一项动物实验中被首次提出。2003年，Barash等首次将该方法应用于人类助孕周期的前一周期。2004年，李蓉等首次在国内报道，胚胎移植周期机械性刺激子宫内膜可提高临床妊娠率。但最新一项多中心随机对照临床试验表明，体外受精-胚胎移植术（Invitrofertilization-embryotransfer，IVF-ET）前行ELI无益于胚胎着床。随着宫腔镜在妇产科领域的广泛应用，越来越多的研究者认为宫腔镜检查可以在直视下对子宫内膜造成“非创伤性”刺激，这适用于评估和改善胚胎移植周期子宫内膜的情况，并且已经被推荐为反复种植失败（Repeatedimplantingfailure，RIF）患者的常规检查。既往有移植失败史的患者同样受到研究者的关注。2017年赵小玲等的研究结果表明宫腔镜子宫内膜微刺激术（Hysteroscopicendometriallocalinjury，HS-ELI）显著提高了既往移植失败、再次冻融胚胎移植（Frozen-thawedEmbryoTransfer，FET）患者的胚胎种植率和临床妊娠率。<br>　　关于子宫内膜微刺激术提高子宫内膜容受性的分子机制尚没有统一的结论。目前的研究多应用免疫组化的方法对子宫内膜组织进行研究，结果发现了一些在子宫内膜种植窗期表达水平有显著改变的生物因子，如LIF、VEGF、MMPs、M-CSF、HOXA-10和雌激素、孕激素受体等，但目前尚没有一个细胞因子被明确与子宫内膜容受性相关。<br>　　目的：<br>　　1.探究HS-ELI对当周期种植窗期内膜容受性和妊娠结局的影响；<br>　　2.应用Olink蛋白组学技术对行HS-ELI组和未干预组当周期排卵后种植窗期的宫腔冲洗液进行检测，筛选出差异显著的蛋白质，并初步探讨HS-ELI提高子宫内膜容受性的分子机制。<br>　　方法：<br>　　1.HS-ELI对应用激素替代治疗（HormoneReplacementTherapy，HRT）或降调节HRT方案准备内膜的FET周期妊娠结局的影响：本研究选取2020年12月至2022年8月在石家庄市妇产医院生殖医学中心行FET既往有至少一次移植失败史患者共270例。根据当周期是否行HS-ELI分为实验组（135例），对照组（135例），统计学分析两组的妊娠结局。<br>　　2.HS-ELI对内膜容受性相关分子的影响：另招募了10名患者，均为拟行FET，但由于个人原因放弃移植的患者。根据当周期是否行HS-ELI分为实验组（5例）及对照组（5例），均于黄体中期（LH+7-9天）获取宫腔冲洗液，对获得的10份宫腔冲洗液样本进行Olink蛋白组学检测及生物信息学分析。<br>　　结果：<br>　　1.HS-ELI对FET妊娠结局的影响<br>　　1.1病例一般资料：实验组和对照组的年龄、体重指数(BMI）、不孕年限、内膜厚度、RIF占比、胚胎移植类型及优质胚胎移植数的差异均无统计学意义（P＞0.05）；内膜准备方案包括HRT和降调节HRT方案，实验组和对照组的占比分别是48.1%vs.50.4%，51.9%vs.49.6%，差异无统计学意义（P＞0.05）；不孕类型的比较差异有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　1.2妊娠结局：实验组和对照组的生化妊娠率为62.22%和49.63%，胚胎种植率分别为42.60%和31.63%，临床妊娠率分别为59.30%和43.00%，以上两组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　2.HS-ELI对当周期种植窗期内膜容受性相关分子的影响<br>　　2.1Olink蛋白组学样本质控结果：纳入样本质控过程的孵育内参为0.19，检测内参为0.08，其NPX值与板中值的偏离程度均控制在±0.3以内，样本通过率为100%。<br>　　2.2Olink蛋白组学分析结果：与对照组相比，胚胎移植周期行HS-ELI组有3个呈显著上调表达的差异蛋白，包括单核细胞趋化蛋白4（MCP-4/CCL13）、胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）、巨噬细胞趋化蛋白2（MCP-2/CCL8），差异均有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　2.3GO功能显著性富集分析结果：HS-ELI组显著上调的3个差异蛋白富集于26个生物学过程条目、3个细胞组分条目和7个分子功能条目。<br>　　2.4.KEGG通路富集分析结果：HS-ELI组显著上调的3个差异蛋白富集到的4条信号通路，这些通路与炎症反应、自身免疫病、异常免疫应答和应激反应有关。<br>　　结论：<br>　　1.FET当周期行HS-ELI可以改善子宫内膜容受性，显著提高生化妊娠率、胚胎种植率和临床妊娠率。<br>　　2.HS-ELI组与未干预组当周期种植窗期宫腔冲洗液的Olink蛋白组学检测发现MCP-2/CCL8、TSLP和MCP-4/CCL13的表达具有显著差异，经富集分析表明这些差异蛋白主要与炎症反应有关。<br>　　3.HS-ELI可能通过诱导内膜炎症反应，促进TSLP、趋化因子等的分泌，提前营造适合胚胎着床的TH2型免疫微环境，提高子宫内膜容受性，同时增强滋养细胞的增殖和侵袭能力，改善妊娠结局。