检索历史 清除

摘要目的：肝内胆管细胞癌（intrahepaticcholangiocarcinoma，ICC）具有高度侵袭性特征，预后极差，其发病机制涉及遗传基因突变及细胞信号通路失调等多个方面。本研究旨在探索FoxM1在ICC中的表达及对ICC细胞生物学行为的影响，同时通过生物信息学分析ICC中FoxM1异常表达所影响的相关信号通路，为临床ICC的诊治提供理论依据。<br>　　方法：1、采集人类癌症基因组图谱（TheCancerGenomeAtlas，TCGA）数据，在mRNA水平上比较ICC组织与正常对照组织中FoxM1的表达情况，并分析FoxM1的表达与ICC患者肿瘤突变负荷评分及预后生存的关系；<br>　　2、检测ICC细胞株中的FoxM1蛋白表达水平，同时采用慢病毒转染建立稳定上调和下调表达FoxM1的ICC细胞株；通过MTT实验及Transwell小室侵袭实验检测其对ICC细胞增殖和侵袭能力的影响；并用qPCR检测各组稳定转染ICC细胞株中MMP-9和MMP-2mRNA表达水平。<br>　　3、收集公共数据库（TCGA和KEGG）数据，按照总体FoxM1mRNA表达值中位数分为FoxM1高表达组和低表达组，通过基因集富集分析（GSEA）比较FoxM1不同表达组之间可能影响的相关信号通路；同时通过qPCR比较ICC细胞系中FoxM1表达变化与P53mRNA水平关系。<br>　　结果：1、生信分析结果提示FoxM1在ICC肿瘤中表达明显高于正常组织（P＜0.0001），FoxM1的表达与ICC的肿瘤突变负荷评分有关（P=0.021），而与ICC的生存预后无明显相关性（P=0.308）。<br>　　2、SSP-25细胞株的FoxM1蛋白表达水平最高，而HCCC-9810细胞株蛋白表达最低（两两比较均P＜0.01，方差分析总体P＜0.0001）；慢病毒转染FoxM1构建稳定转染ICC细胞株后，FoxM1过表达能增强ICC细胞的增殖及侵袭能力，而下调FoxM1表达则抑制ICC细胞的生长及侵袭能力。FoxM1过表达能增强ICC细胞中MMP-9及MMP-2mRNA的表达（均P＜0.05）；<br>　　3、GSEA分析表明，ICC中FoxM1高表达时较多基因信号通路如P53、PLK1信号通路表达差异有明显变化（均FDR-q值＜0.250）。qPCR结果显示，慢病毒转染后上调FoxM1表达的HCCC-9810-FoxM1细胞组中P53mRNA表达较对照组明显上升，而下调FoxM1表达的SSP-25-shFoxM1细胞组中P53mRNA水平比对照组则明显下降（P＜0.0001）。<br>　　结论：1.FoxM1促进ICC细胞增殖及侵袭。<br>　　2.FoxM1可能调控ICC细胞中MMP-9及MMP-2的表达。<br>　　3.FoxM1在ICC中的表达可能与P53信号通路相关。