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摘要炎症性肠病（IBD）是一种胃肠道慢性炎症性疾病，发病机制复杂。随着发病率的不断提高和治疗方案的缺乏，人们对于炎症性肠病的关注度越来越高。由于目前IBD的治疗仅停留在维持缓解症状上，因此，寻找IBD有效治疗药物是研究人员需要攻克的难关。在IBD病程中，肠道巨噬细胞的激活形式与病程的转归密切相关，因此靶向巨噬细胞极化的治疗方式具有良好的前景。研究发现，谷胱甘肽合成的中间体γ-谷胺酰半胱氨酸（γ-GC）具有调节细胞内氧化还原平衡的作用，可以有效的治疗脓毒症等疾病。然而，关于γ-GC是否参与调控巨噬细胞极化进而抑制炎症反应及炎症相关疾病的作用还没有完整的数据支持。因此，本论文旨在探究γ-GC通过调控巨噬细胞极化治疗炎症性肠病的分子机制，从而为IBD的治疗提供新的研究思路。<br>　　首先，我们在体内实验中探究γ-GC对炎症性肠病的保护作用。结肠炎小鼠模型中发现，造模后，γ-GC治疗组可以显著提高IBD小鼠的存活率、体重下降率以及改善结肠组织损伤，减轻结肠炎症反应，同时降低IBD小鼠的疾病活动指数，且随着给药浓度的提高，γ-GC对IBD小鼠的治疗效果越好。ELISA实验结果表明γ-GC可以显著降低IBD小鼠结肠中促炎因子TNF-α的释放，从而减轻小鼠炎症反应。以往研究表明，巨噬细胞极化与IBD病程密切相关，因此，我们进一步探究了γ-GC在IBD病程中M1型、M2型极化的影响。WesternBlot结果显示，IBD小鼠结肠组织中M1型巨噬细胞标志物蛋白iNOS、IL-1β的表达显著上调，M2型巨噬细胞标志物蛋白CD206和ARG1的表达显著降低，而给予γ-GC治疗后，明显降低iNOS、IL-1β的表达量，同时提高CD206和ARG1的蛋白表达。以上实验数据初步证明γ-GC可以通过影响巨噬细胞极化达到治疗IBD的效果。<br>　　其次，我们使用RAW264.7细胞与小鼠骨髓源巨噬细胞在体外构建巨噬细胞极化体系，以LPS和IFN-γ联合刺激巨噬细胞极化为M1型后，探究γ-GC对于M1型巨噬细胞的影响，结果发现γ-GC有效抑制巨噬细胞向M1型极化；同时IL-4刺激巨噬细胞极化为M2型后，探究γ-GC对于M2型巨噬细胞的影响，结果发现γ-GC显著促进巨噬细胞向M2型极化。接着，我们用LPS和IFN-γ联合刺激，再以γ-GC处理，结果表明，γ-GC促进巨噬细胞从M1型向M2型复极化。进一步研究表明，γ-GC通过抑制JAK1/STAT1/3信号通路抑制巨噬细胞M1型极化，同时通过上调STAT6磷酸化水平促进巨噬细胞向M2型极化，进而抑制MAPKs和NF-κB信号通路活化。该结果在IBD小鼠结肠组织中进一步得到了验证。已有研究表明AMPK/Sirt1通路的激活一方面抑制JAK/STAT1/3磷酸化，另一方面促进STAT6磷酸化。因此，为了进一步探究γ-GC是否通过激活AMPK/Sirt1参与到调控巨噬细胞极化的具体分子机制，我们分别使用AMPK以及Sirt1的抑制剂，结果表明γ-GC能够上调由化合物C（AMPK抑制剂）引起的M2型指标、AMPK及Sirt1活性下降；与此同时，γ-GC能够逆转由LPS、IFN-γ及EX527（Sirt1抑制剂）联合刺激引起的M2型指标及Sirt1活性下降。以上结果表明：γ-GC通过激活AMPK/Sirt1，抑制JAK1/STAT1/3、MAPKs和NF-κB信号通路与促进IL-4/STAT6信号通路，从而达到抑制巨噬细胞向M1型极化和促进巨噬细胞从M1型向M2型复极化的作用。同时，流式实验数据显示，在Jurcat细胞中γ-GC可以促进T细胞向Th2向分化。<br>　　综上所述，我们基于体内、外实验，从动物和细胞水平多角度验证，初步阐明了γ-GC调控巨噬细胞极化的具体机制，并为其成为治疗IBD的潜在药物奠定基础。本研究内容对于IBD的治疗有着基础研究意义，同时对其他巨噬细胞极化相关疾病也有着一定的指导意义。