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基于表面增强拉曼光谱检测新型冠状病毒

摘要新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是一种由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染导致的肺炎,对人类的健康乃至生命安全造成了严重的危害。SARS-CoV-2具有单股正链RNA基因组,CoV基因组编码四种结构蛋白:刺突蛋白(S)、包膜蛋白(E)、膜蛋白(M)和核衣壳蛋白(N)。与严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)相似,新型冠状病毒会导致人类和动物出现轻度至中度的上呼吸道疾病。早发现、早报告、早隔离、早治疗是提高治愈率以及抑制疫情蔓延的关键。表面增强拉曼光谱(SERS)是一种快速、灵敏的振动光谱技术,需要最少的样品制备并提供高度特异性的分子指纹。SERS已成为一种流行的检测生物分子(包括蛋白质和病毒)的分析方法,该技术可用于开发SARS-CoV-2的定量检测方法,可为世界各地的患者提供即时准确的SARS-CoV-2检测结果。因此,本论文发展了基于SERS技术的新型冠状病毒蛋白的高灵敏检测新方法:<br>  1、我们开发了一种通过直接病毒蛋白检测识别SARS-CoV-2的有效方法,我们设计并制作了一种新型的长程SERS(LR-SERS)基底,该基底采用Au纳米板(AuNPL)薄膜/MgF2/Au镜/玻璃结构,以提高扩展的电场导致的LR-SERS。应用LR-SERS技术检测SARS-CoV-2刺突蛋白(S蛋白),无试剂检测的最低检出限为9.8×10?11gmL?1,而且能够清晰的区别SARS-CoVS蛋白。该技术还可以在5min内检测唾液中的S蛋白,灵敏度为98%,特异性为100%。<br>  2、我们开发了一种SERS频移免疫分析用于新型冠状病毒结构蛋白的超灵敏双重检测,该免疫分析方法报告了一种特殊效应,即与抗体共轭的SERS活性探针分子的振动频率与靶向抗原的浓度定量相关。我们借助了单层紧密排列的金六角纳米板阵列作为高活性SERS基底,开发的免疫测定对S蛋白和N蛋白表现出较高的敏感性和特异性,最低检测限为9.8×10?15gmL?1(S蛋白),8.1×10?15gmL?1(N蛋白),这些研究表明这种传感方式在临床治疗中具有潜在的用途。

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