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摘要乳腺癌（Breastcancer，BC）是全球女性最常见的恶性肿瘤，严重危害女性健康。随着诊疗技术的高速发展，乳腺癌的治愈率、病人的存活率明显提高。然而缺乏特异性的诊断标志物，绝大部分乳腺癌患者确诊时多为中晚期阶段。患者错失最佳治疗窗，只能接受创伤性更大的手术治疗。乳腺癌筛查技术，如乳腺癌钼靶x线、B超、CT及组织活检都存在一定的漏诊率，难以做到对BC的早发现、早诊断。早期检测技术缺陷导致BC患病率逐年增长,BC病人的基数不断扩大。所以亟需一种创伤性小、特异性高、敏感性强的早期筛技术。环状RNA（circRNA）是一种结构保守、组织特异性强、稳定性良好的非编码RAN（Non-codingRNA，ncRNA），在肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等多种疾病中发挥着重要价值，是一种潜在的新型血清标志物。外周血中的circRNA丰富度较低，基因测序的检测方式精准度高但价格昂贵，实时荧光定量PCR检测能力有限，可能漏检低拷贝的circRNA。为实现精准化的检测与诊断，我们需要更精确的检测方式以探究circRNA含量与BC的作用关系。量化检测标志物不仅有助于乳腺癌诊断精准化，对乳腺癌机制探究也具有一定的研究意义。<br>　　微滴式数字PCR（DropletdigitalPCR，ddPCR）将核酸分子稀释到单分子水平检测，是一种特异性强、灵敏度高、受干扰影响小的绝对定量检测方式。该方法测量外周血清微量circRNA具有独特的优势。<br>　　本研究旨在构建检测circRNA-hsa_circ_0044235的ddPCR检测方法，研究其作为乳腺癌早期诊断标志物的应用和与乳腺癌临床信息的相关性。结果显示hsa_circ_0044235在实验组血清中呈低表达，对乳腺癌的早期筛查、诊断具有积极的提示作用，对乳腺癌多种临床表现具有一定影响。<br>　　研究目的：<br>　　1.本研究旨在构建检测乳腺癌hsa_circ_0044235的ddPCR方法，检测该标志物在实验组与对照组中的含量差异，进一步探究其分子诊断能力。<br>　　2.探索hsa_circ_0044235的来源、验证其结构特点。<br>　　3.结合临床数据初步研究hsa_circ_0044235与乳腺癌临床信息的相关性。<br>　　研究方法：<br>　　首先，通过circRNA基因测序技术检测出血清中circRNA的表达谱。比较实验组和对照组血清测序结果，选择差异表达的hsa_circ_0044235作为研究目标，进一步分析hsa_circ_0044235的来源、结构组成和性能特点。用qPCR和ddPCR方法检测实验组及对照组中hsa_circ_0044235的含量，绘制受试者工作曲线（ROC曲线）评估hsa_circ_0044235的分子诊断性能。最后，结合临床数据分析hsa_circ_0044235与乳腺癌临床信息的相关性。<br>　　研究结果：<br>　　1.血清circRNA基因测序结果提示，以表达量差异倍数（Foldchange，FC）为1.5,P＜0.05为标准时，血清circRNA表达谱中存在109个差异性表达的circRNA，其中有58个circRNA表达上调，有51个circRNA表达下调。<br>　　2.成功构建检测乳腺癌血清hsa_circ_0044235的ddPCR方法。<br>　　3.hsa_circ_0044235在乳腺癌患者血清中呈低表达趋势。<br>　　4.hsa_circ_0044235具有较好的稳定性，可作为乳腺癌分子诊断标志物。<br>　　5.hsa_circ_0044235与乳腺癌的临床分期、病理分型、手术治疗、淋巴结转移等临床信息均存在一定的相关性，提示hsa_circ_0044235可能对乳腺癌的病情进展、疗效评估产生一定的提示作用，对乳腺癌的机制研究具有积极的指导作用。