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基于“预培其损”探讨补肾固冲汤对复发性流产模型小鼠子宫蜕膜组织OPN、PTN表达的影响

摘要目的:基于“预培其损”防治原则为理论指导,观察补肾固冲汤对复发性流产模型小鼠(CBA/J×DBA/2)子宫、胚胎及胎盘发育情况的影响,计算胚胎丢失率,检测子宫蜕膜组织多效生长因子(pleiotrophin,PTN)、骨桥蛋白(Osteopontin,OPN )的表达,探究补肾固冲汤在妊娠识别、胚胎植入、滋养细胞入侵、螺旋动脉重塑和胚胎发育方面的作用,为临床上补肾固冲汤治疗复发性流产提供理论支持。<br>  方法:1.购入小鼠,适应性喂养7天后,将雌性CBA/J小鼠用随机数字表法分为正常组、模型组、中药组,每组20只;RSA模型组及正常妊娠组雌性予开始予以等剂量生理盐水,中药组予以21g/Kg补肾固冲汤灌胃,3个动情周期后开始合笼。采用雌性CBA/J与雄性BalB/c小鼠按照2:1比例合笼交配建立正常妊娠模型组、雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠按照2:1比例合笼交配建立RSA模型组、中药组。将阴栓明显阳性小鼠分为6组,依据灌胃天数分别为:妊娠D9.5正常组、妊娠D12.5正常组、妊娠D9.5RSA模型组、妊娠D12.5RSA模型组、妊娠D9.5补肾固冲汤组、妊娠D12.5补肾固冲汤组。怀孕后继续以相同方法灌胃,分别于D9.5、D12.5断颈处死小鼠。2.观察小鼠子宫、胚胎及胎盘发育情况,计算胚胎吸收率;免疫组织化学法检测OPN和PTN蛋白的表达;Real-time PCR检测PTN mRNA、OPN mRNA表达;Western-blotting检测小鼠子宫蜕膜组织PTN、OPN蛋白表达。<br>  结果:1.剖视观察D9.5及D12.5天正常组小鼠及子宫、胚胎发育良好,呈现淡红色串珠样,质地均匀,大小均一,胚胎着床处未见淤点,血管发育良好,但D12.5个别小鼠存在流产胚胎组织,较正常胚胎组织略小,表面呈现淤血状,胚胎丢失率为7.32%;D12.5天模型组妊娠小鼠胚胎发育较差,形态呈现竹节状,大小不一,质地不均匀,胚胎着床处呈现黑褐色改变或见到残留胚胎组织,甚则胚胎组织消失,残留胎盘组织明显小于其他胎盘组织,胚胎丢失率为46.81%;D9.5补肾固冲汤组胚胎呈现淡红色,质地均匀,腔内未见明显出血点,胚胎发育良好;D12.5天补肾固冲汤组流产胚胎数明显少于模型组,质地均匀,大小基本一致,少数胚胎着床处呈现黑褐色改变,胚胎丢失率为13.33%。2.D9.5三组妊娠小鼠均未出现明显胚胎丢失;D12.5:与正常妊娠组相比,模型组胚胎丢失率显著上升(P<0.01);与RSA模型组相比,补肾固冲汤组胚胎丢失率显著降低(P<0.01)。3.与正常妊娠组小鼠相比,D9.5模型组小鼠骨桥蛋白(OPN)、多效生长因子(PTN)表达升高(P<0.05),D12.5表达降低(amp;nbsp;P<0.01);与模型组小鼠相比,D9.5补肾固冲汤组小鼠OPN、PTN表达没有显著性差异,D12.5明显升高(P<0.01)。通过免疫组织化学法对两种生长促进因子(Growth Promoting Factors,GPFs)PTN、OPN进行检测发现OPN在妊娠小鼠子宫腔上皮、腺上皮、基质细胞上均有表达,PTN在妊娠小鼠子宫上皮细胞和子宫腺体细胞中均有表达;与正常妊娠组相比,D12.5模型组OPN、PTN表达降低(P<0.05);与模型组相比,D12.5中药组OPN、PTN表达显著增强(P<0.05)。<br>  结论:补肾固冲汤能够改善RSA小鼠妊娠子宫、胚胎及胎盘发育状况,降低RSA小鼠胚胎丢失率;同时,可以提高小鼠怀孕早期OPN、PTN表达水平,改善复发性流产模型小鼠母胎界面相关蛋白表达,对小鼠子宫蜕膜组织、胚胎及胎盘发育有一定的促进作用,可降低胚胎吸收率,改善妊娠结局。

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导师 李楠
学位信息:
陕西中医药大学 中医学 中医妇科学(硕士) 2023年
分类号 R714.21R285.5
发布时间 2024-07-05
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