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摘要目的：<br>　　1.探究低氧下肺动脉平滑肌细胞的凋亡及焦亡情况。<br>　　2.探究 AhR 是否参与低氧诱导肺动脉平滑肌细胞焦亡及凋亡的调控。<br>　　方法：<br>　　1. 以人传代肺动脉平滑肌细胞（HPASMCs）为研究对象，设置常氧组和低氧组。低氧处理6h、12h、24h、36h后，用CCK8检测细胞活性、用细胞流式术检测凋亡情况，以建立肺动脉平滑肌低氧模型。<br>　　2. 设置常氧组、低氧组、低氧+ITE（AhR激动剂）、低氧+CH223191 （ AhR抑制剂） ，用Hoechest33342/PI检测细胞焦亡情况，qPCR检测Q-PCR检测焦亡关键基因（NLRP3、GSDMD、Caspase1 ）、凋亡关键基因（ BAX、BCL-2、Caspase3 ）及AhR转录情况、WB检测焦亡及其关联蛋白（GSDMD、GSDMD-NT、Caspase1、NLRP3 ）、凋亡关键蛋白（ BAX、BCL-2、Caspase3）、AhR的表达。<br>　　结果：<br>　　1. 确定低氧性肺动脉平滑肌细胞低氧模型最佳时间点。3%低氧分别处理 HPASMCs 细胞 6h、12h、24h、36h后，CCK8 结果示：与常氧组比，低氧组的细胞活性从 12h 起显著上升。提示低氧能诱导 HPASMCs 增殖，且具有时间依赖性。流式结果示：与常氧组比，低氧下各组的细胞凋亡率均显著降低，且低氧各组间无显著差异。综上以24h作为建模时间点。<br>　　2. 确定 CH223191及 ITE 处理的最佳浓度。CCK8 结果示：低氧情况下最佳浓度的 CH223191(20μmol/L)可提高 HPASMCs细胞增殖活性。ITE (20μmol/L)可抑制 HPASMCs细胞增殖活性。<br>　　3. 确定 CH223191及 ITE对 HPASMCS焦亡阳性细胞比例的影响Hoechest/PI 结果示：对比常氧组，低氧组红色荧光增强，焦亡阳性细胞比例增加：CH223191 组中红色荧光减弱，焦亡阳性细胞比例减少，ITE组中红色荧光增强，焦亡阳性细胞比例增多。<br>　　4. 确定 CH223191 及 ITE 对 AhR mRNA 表达的影响。对比常氧组，低氧及 ITE促进 AhR mRNA 的表达，CH223191 抑制其表达确定CH223191及ITE对焦亡相关分子mRNA的影响<br>　　5. 确定 CH223191及 ITE对焦亡相关分子 mRNA的影响对比常氧组，低氧可促进 Caspase1、NLRP3、GSDMD 表达。低氧下，ITE 可促进 Caspase1、NLRP3 的表达。CH223191 可抑制Caspase1、NLRP3、GSDMD的表达。<br>　　6. 确定 CH223191及 ITE对凋亡相关分子 mRNA的影响对比常氧组，低氧可降低Caspase3、BAX表达，促进BCL2表达。低氧下，ITE 可抑制 Caspase3 的表达，促进 BCL-2 的表达。CH223191可抑制BCL-2的表达，促进Caspase3、Bax表达<br>　　7. 确定 CH223191 及 ITE 对 AhR蛋白表达的影响对比常氧组，低氧可促进 AhR 表达。低氧下，ITE 促进 AhR 的表达。CH223191可抑制AhR的表达<br>　　8. 确定 CH223191 及 ITE 对焦亡相关蛋白表达的影响对比常氧组，低氧促进 NLRP3、GSDMD、Caspase1 的表达。低氧情况下， ITE 促进 NLRP3、GSDMD、Caspase1 的表达，而CH223191抑制其表达。<br>　　9. 确定 CH223191 及 ITE 对凋亡相关蛋白表达的影响对比常氧组，低氧促进BCL-2，抑制Caspase3、BAX的表达。低氧情况下，ITE 促进 BCL-2，抑制 Caspase3、BAX 的表达，而CH223191抑制BCL-2，促进Caspase3、BAX的表达。<br>　　结论：<br>　　低氧能通过激活AhR途径，促进肺动脉平滑肌细胞的焦亡，同时抑制了凋亡过程。