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摘要【目的】<br>　　1.设计、合成靶向内质网且具有抗肿瘤活性的金属铱(Ⅲ)和钌(Ⅱ)配合物。<br>　　2.探讨金属铱(Ⅲ)配合物Ir1-Ir3诱导骨肉瘤细胞发生免疫原性死亡的机制。<br>　　3.探讨金属钌(Ⅱ)配合物Ru1-Ru3诱导肿瘤细胞发生焦亡和抗肿瘤免疫的机制。<br>　　4.探讨金属铱(Ⅲ)配合物Ir4-Ir6对肿瘤细胞发生迁移侵袭的影响和体内抗血管生成的效果。<br>　　【方法】<br>　　1.用质谱、核磁共振、元素分析等方式表征配合物结构，并测定配合物的紫外-可见光谱和荧光发射光谱。<br>　　2.用MTT法测定金属铱(Ⅲ)和钌(Ⅱ)配合物的体外抗肿瘤活性，用激光共聚焦观察配合物在细胞内的定位、细胞摄取方式和钙离子分布情况等；用流式细胞术分析细胞内ROS水平、线粒体膜电位改变情况以及细胞凋亡程度；采用免疫荧光法检测配合物干预肿瘤细胞后CRT是否移位到细胞膜；采用ELISA法检测细胞释放HMGB1的水平；最后使用WesternBlot验证配合物对凋亡蛋白、焦亡蛋白以及内质网应激相关蛋白表达的影响。<br>　　【结果】<br>　　1.设计、合成并表征了三个金属铱(Ⅲ)配合物Ir1-Ir3。细胞毒性测试结果显示，Ir1（IC50＝0.4±0.1μM）在所选细胞系中显示出在三个配合物中最好的抗癌活性。在机制研究中，Ir1诱导内质网应激，进一步导致肿瘤细胞发生免疫原性死亡，激活机体对肿瘤的免疫反应。<br>　　2.设计、合成并表征了三个金属钌(Ⅱ)配合物Ru1-Ru3。在MTT实验中，Ru1-Ru3具有高细胞毒性。当Ru3与乳腺癌（MCF-7）细胞共培养2h后，Ru3已经能够通过内吞的方式进入细胞，并聚集于内质网和线粒体中。在抗肿瘤免疫研究中，Ru3能够诱导肿瘤细胞发生免疫原性死亡的同时，还能通过cGAS-STING通路加强机体免疫反应。<br>　　3.设计、合成并表征了三个金属铱(Ⅲ)配合物Ir4-Ir6。在机理研究中发现，Ir4-Ir6均是通过能量依赖的方式进入细胞，并定位于溶酶体或内质网中。三个配合物能够使细胞内的ROS水平上升，进一步诱导细胞发生焦亡。Ir4-Ir6能够抑制细胞迁移，在抗血管生长实验中，发现Ir4-Ir6能够不同程度的抑制斑马鱼胚胎体内的血管生成。<br>　　【结论】<br>　　1.成功合成并表征了两组铱(Ⅲ)配合物和一组钌(Ⅱ)配合物。<br>　　2.合成的铱(Ⅲ)配合物具有良好的抗肿瘤活性，Ir1能够同时靶向线粒体和内质网，诱导细胞发生凋亡。Ir1能够使内质网应激，进而诱导细胞免疫原性死亡，属于Ⅱ型免疫原性死亡诱导剂。<br>　　3.合成的钌(Ⅱ)配合物具有高细胞毒性，Ru3能够将细胞周期阻滞在S期，通过诱导细胞发生焦亡，释放炎症因子，进一步诱导肿瘤细胞发生免疫原性死亡。