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摘要目的和意义：<br>　　1.比较GAS5、miR-26a-5p、PRKCD和PLCB1在2型糖尿病（T2DM）患者、2型糖尿病冠心病共病患者和健康对照人群中表达差异，分析不同组中GAS5与miR-26a-5p、PRKCD和PLCB1的表达相关性，为揭示2型糖尿病冠心病共病的发病机制提供线索和依据。<br>　　2.探讨GAS5对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）冠状动脉粥样硬化相关基因表达的调控作用，为揭示GAS5致冠状动脉粥样硬化的分子机制提供依据。<br>　　3.利用基因表达综合数据库（GEO）数据库，通过生物信息学方法分析，进一步揭示GAS5与miR-26a-5p、PRKCD和PLCB1在T2DM患者和2型糖尿病冠心病共病患者中的表达差异。<br>　　方法：<br>　　1.采用病例对照研究，纳入T2DM患者、2型糖尿病冠心病共病患者和健康对照人群，用Trizol法提取T2DM患者、2型糖尿病冠心病共病患者和健康对照人群外周血单个核细胞（PBMCs）的总RNA。通过qRT-PCR实验明确GAS5、miR-26a-5p、PRKCD和PLCB1在T2DM患者、2型糖尿病冠心病共病患者和健康对照组中差异表达，分析在不同组中GAS5与miR-26a-5p、PRKCD和PLCB1的相关性，探究这4个基因与T2DM患者、2型糖尿病冠心病共病患者之间的关系。<br>　　2.使用starbase数据库预测GAS5与miR-26a-5p、miR-26a-5p与PRKCD的结合位点，通过双荧光素酶报告基因实验验证GAS5与hsa-miR-26a-5p、miR-26a-5p与PRKCD的靶向关系。<br>　　3.利用HUVEC细胞，用不同葡萄糖浓度干预，检测不同糖浓度中基因的表达情况；转染siGAS5，并用qRT-PCR检测转染效率；将细胞分为正常组（葡萄糖浓度5.56mmol/L培养基培养）、高糖组（葡萄糖浓度27.78mmol/L培养基培养）、高糖+siGAS5组（葡萄糖浓度27.78mmol/L培养+转染siGAS5细胞）和高糖+siNC组，利用qRT-PCR实验检测不同组间GAS5、miR-26a-5p、PRKCD和PLCB1的基因表达变化。<br>　　4.基于NCBIGEO数据库获取和预处理数据库中T2DM和T2DM合并心血管疾病的芯片数据集；提取芯片数据集中GAS5、miR-26a-5p、PLCB1和PRKCD的数据进行差异分析。<br>　　结果：<br>　　1.相对于健康对照人群，GAS5在2型糖尿病冠心病共病患者中表达量增加（P＜0.05）；PRKCD在T2DM患者中表达量增加（P＜0.05）；miR-26a-5p在2型糖尿病冠心病共病患者中表达量下降（P＜0.05）；相对于2型糖尿病患者，PLCB1在2型糖尿病冠心病共病患者中表达量增加（P＜0.05）；PRKCD在2型糖尿病冠心病共病患者中表达量下降（P＜0.05）。<br>　　2.相关性分析结果显示，T2DM患者中，miR-26a-5p和低密度脂蛋白呈正相关关系（r=0.424,P＜0.05）;GAS5与miR-26a-5p（r=-0.523,P＜0.05）呈负相关关系；2型糖尿病冠心病共病患者中，miR-26a-5p和空腹血糖之间呈正相关关系（r=0.407,P＜0.05）;PRKCD和TC(r=-0.449)、LDL(r=-0.425)之间呈负相关关系（P＜0.05）。<br>　　3.双荧光素酶报告基因结果显示，miR-26a-5pmimics显著降低了野生型GAS5的荧光素酶活性(P＜0.05)，但未发现对突变型GAS5荧光素酶活性有影响（P＞0.05）；miR-26a-5pmimics显著降低了野生型PRKCD的荧光素酶活性(P＜0.05)，但未发现对突变型PRKCD荧光素酶活性有影响（P＞0.05）。<br>　　4.核心基因的的表达水平检测结果显示，相对于对照组、高糖组和高糖+siNC组，GAS5在高糖+siGAS5组中表达量下降(P＜0.05)。miR-26a-5p、PLCB1和PRKCD，在高糖组、高糖+siGAS5组和高糖+siNC组中表达无差异（P＞0.05）。<br>　　5.GEO数据库的T2DM和T2DM合并心血管疾病数据集差异分析显示，GAS5、miR-26a-5p、PLCB1和PRKCD在T2DM和T2DM合并心血管疾病患者诱导多能干细胞分化的内皮细胞中表达无差异（P＞0.05）；T2DM和T2DM合并心血管疾病患者诱导多能干细胞分化的血管平滑肌细胞中表达差异分析结果显示，miR-26a-5p和PLCB1在T2DM合并心血管疾病中表达量下降（P＜0.05），GAS5和PRKCD表达无差异（P＞0.05）。<br>　　结论：<br>　　GAS5在2型糖尿病冠心病共病患者PBMCs中高表达，miR-26a-5p在2型糖尿病冠心病共病患者患者PBMCs中低表达。GAS5可能通过miR-26a-5p从而介导2型糖尿病冠心病共病发生发展。