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摘要目的：<br>　　探讨P.gingivalis感染与CD155、T细胞TIGIT（T cell immunoreceptor with IG and ITIM domains）表达以及与CD8+T淋巴细胞三者之间的相关性，阐明P.gingivalis通过CD155/TIGIT分子轴介导食管癌免疫抑制的分子机制，为P.gingivalis感染的食管癌患者提供相关病因学和防治策略的理论依据。<br>　　方法：<br>　　1.选择食管癌患者手术标本，采用免疫组化方法，检测食管癌患者肿瘤组织中P.gingivalis感染状况，食管癌细胞CD155、T细胞TIGIT的表达及CD8+T淋巴细胞的浸润情况；采用卡方检验，分析P.gingivalis感染与CD155、T细胞TIGIT表达以及与CD8+T淋巴细胞三者之间的相关性；分析食管癌细胞膜表面T细胞TIGIT蛋白的表达与食管癌患者临床病理特征之间的相关性。<br>　　2.采用Western blot检测P.gingivalis感染不同时间点的食管癌细胞系KYSE150细胞CD155蛋白表达水平；采用ICC实验方法检测P.gingivalis感染与CD155相互作用关系。<br>　　3.应用健康人群外周血CD8+T淋巴细胞与食管癌细胞系KYSE150细胞共培养，对KYSE150细胞进行不同的处理，分为如下4组：①P.gingivalis感染KYSE150细胞组；②P.gingivalis感染KYSE150细胞联合TIGIT抑制剂组；③P.gingivalis感染KYSE150细胞联合PD-1抑制剂组；④P.gingivalis感染KYSE150细胞联合TIGIT抑制剂和PD-1抑制剂组；采用流式细胞术方法，检测各组CD8+T淋巴细胞穿孔素（Perforin），颗粒酶（Granzyme B）、IFN-γ的表达水平，及共培养环境中CD8+T淋巴细胞的杀伤能力。<br>　　4.根据实验需要，构建P.gingivalis感染食管癌细胞系KYSE150细胞-CD8+T淋巴细胞荷瘤小鼠治疗模型，分组为如上述共培养分组；剥离荷瘤小鼠皮下肿瘤进行对比，探索不同用药组中小鼠的肿瘤负荷及生长状况。<br>　　结果<br>　　1.免疫组化结果发现，与未感染组相比，P.gingivalis感染的食管癌组织中肿瘤细胞胞质可见着色CD155、T细胞TIGIT高表达，间质中CD8+T淋巴细胞浸润较少；CD155、T细胞TIGIT的高表达以及CD8+T淋巴细胞浸润减少与感染P.gingivalis的食管癌患者之间存在正相关性；食管癌细胞膜表面T细胞TIGIT蛋白表达与分化程度呈负相关，与淋巴结转移及临床分期成正相关。<br>　　2.P.gingivalis感染食管癌细胞KYSE150后，分别提取不同时间段（0h，12h，24h，48h）细胞蛋白，用Western blot实验方法检测CD155基因蛋白表达的变化水平。研究结果显示：随着时间的延长，P.gingivalis感染促进食管癌细胞CD155蛋白表达增高，其中24h蛋白表达水平最高；将P.gingivalis感染的KYSE150细胞固定，分别用P.gingivalis一抗与AF488绿色荧光二抗染色，用CD155一抗与AF555红色荧光二抗染色，进行共聚焦成像，结果表明，P.gingivalis感染的肿瘤细胞质被AF488绿色荧光标记，结合红色荧光的CD155和结合绿色荧光的P.gingivalis感染的食管癌肿瘤细胞可以出现共定位，两者可以发生互作；<br>　　3.将不同处理组P.gingivalis感染KYSE150细胞与CD8+T淋巴细胞体外共培养，应用流式细胞术的方法，检测各组CD8+T淋巴细胞表达的穿孔素（Perforin），颗粒酶（Granzyme B）、IFN-γ的水平，及共培养环境中CD8+T细胞的杀伤能力；与对照组相比，TIGIT抑制剂和PD-1抑制剂联合用药组较单独使用TIGIT抑制剂及单独使用PD-1抑制剂组中CD8+T淋巴细胞Perforin，Granzyme B，IFN-γ的表达水平及CD8+T细胞的杀伤能力明显增强。<br>　　4.构建P.gingivalis感染食管癌细胞系KYSE150细胞-CD8+T淋巴细胞荷瘤小鼠治疗模型，实验结果表明，与对照组相比，使用Tiragolumab（TIGIT抑制剂）组与使用BMS-1（PD-1抑制剂）组中肿瘤体积生长相近，而使用Tiragolumab和BMS-1双靶用药组与单独使用Tiragolumab和BMS-1组相比，可以显著抑制荷瘤小鼠肿瘤体积的生长；与对照组相比，使用Tiragolumab组与使用BMS-1两组中肿瘤负荷及肿瘤大小相近，而使用Tiragolumab和BMS-1双靶用药组与单独使用Tiragolumab和BMS-1相比，肿瘤负荷及肿瘤体积明显减小。<br>　　结论：<br>　　P.gingivalis感染食管癌细胞可诱导CD155和T细胞TIGIT高表达，导致肿瘤免疫微环境抑制，从而使T细胞的增殖、趋化及共培养环境中肿瘤细胞的杀伤能力受阻，为CD155和T细胞TIGIT可能成为未来攻克食管癌的靶点之一提供理论基础。