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摘要目的：<br>　　KRAS突变型结直肠癌占结直肠癌（ColorectalCancer，CRC）总病例的35-45%，是一种对多种治疗方法均不敏感的疾病类型。索拉非尼是一种口服多激酶抑制药，可以阻断RAS信号通路，直接抑制肿瘤细胞的增殖，其中一个重要机制是依赖于对溶质载体家族7成员11（SoluteCarrierFamily7Member11，SLC7A11），即氨基酸运输系统Xc?的关键亚基进行调控，进而诱导铁死亡。尽管索拉非尼在针对KRAS突变的结直肠癌治疗中展现了一定的疗效，但效果并不显著。因此，提高KRAS突变的结直肠癌对索拉非尼的敏感性，无疑为开发新型KRAS突变的结直肠癌治疗手段提供了新方向。<br>　　鉴于课题组前期结果发现NADH脱氢酶[泛醌]铁硫蛋白2（NADHdehydrogenase[ubiquinone]ironsulfideprotein2，NDUFS2）在铁死亡过程中的潜在作用，本研究选取KRAS突变的结直肠癌细胞系HCT116作为研究对象，通过调控NDUFS2的表达，影响HCT116细胞的铁死亡，以此改善其对索拉非尼的敏感性。此外，本研究还将初步探索这一过程中的潜在机制，以期能为KRAS突变的结直肠癌治疗提供新的策略和思路。这一研究不仅有助于深化对KRAS突变结直肠癌机制的理解，更可能为开发新型治疗策略提供重要的理论依据和实践指导。<br>　　方法：<br>　　本研究首先构建NDUFS2过表达和敲低的HCT116稳转细胞系，应用RT-qPCR、WesternBlot、免疫荧光染色技术进行验证。后采用铁死亡诱导剂Erastin建立HCT116细胞铁死亡模型，采用CCK-8和谷胱甘肽（GSH）测定技术、丙二醛（MDA）测定技术、细胞铁（Fe）测定技术，对NDUFS2在结直肠癌细胞铁死亡中的作用进行研究。利用生物信息学技术分析铁死亡相关基因与NDUFS2的相关性，并利用RT-qPCR、WesternBlot技术对结果进行验证。在此基础上，采用CCK-8、克隆形成技术和谷胱甘肽（GSH）测定技术、丙二醛（MDA）测定技术、细胞铁（Fe）测定技术，探究NDUFS2通过铁死亡调控HCT116细胞对索拉非尼敏感性的影响。<br>　　结果：<br>　　（1）构建NDUFS2过表达和敲低的HCT116稳转细胞系。RT-qPCR、WesternBlot结果证明，NDUFS2过表达细胞系中，NDUFS2的mRNA与蛋白水平均高表达；NDUFS2敲低细胞系中，NDUFS2的mRNA与蛋白水平表达均降低。<br>　　（2）CCK-8实验结果表明，NDUFS2过表达能够抑制Erastin诱导的HCT116细胞的铁死亡；NDUFS2敲低能够促进HCT116细胞的铁死亡。<br>　　（3）铁死亡标志物MDA、GSH、铁含量检测结果表明，NDUFS2过表达组与对照组相比，MDA水平降低，GSH的含量升高及铁蓄积减少；NDUFS2敲低组与对照组相比，MDA水平升高，GSH含量降低及铁蓄积增加。<br>　　（4）生物信息学分析结果表明，铁死亡相关基因HIF-1α与NDUFS2具有相关性。RT-qPCR、WesternBlot实验结果表明NDUFS2过表达的HCT116稳转细胞系中，HIF-1α表达同样升高，NDUFS2敲低的HCT116稳转细胞系中，HIF-1α表达降低，进一步证实生信分析结果。<br>　　（5）索拉非尼作用于HCT116细胞，CCK-8实验结果表明，NDUFS2过表达时，细胞存活率相比对照组高，敲低NDUFS2细胞存活率较对照组低。克隆形成实验结果表明，NDUFS2过表达组的克隆数目于对照组相比增多，NDUFS2敲低组的克隆数目较对照组明显减少。铁死亡标志物MDA、GSH、铁含量检测结果表明，NDUFS2过表达组与对照组相比，MDA水平降低，GSH的含量升高及铁蓄积减少，；NDUFS2敲低组与对照组相比，MDA水平升高，GSH的含量降低及铁蓄积增加。<br>　　结论：<br>　　（1）抑制NDUFS2具有促进结直肠癌细胞HCT116铁死亡的作用，为KRAS突变型的结直肠癌的治疗提供了新的靶点。<br>　　（2）NDUFS2可能通过调控关键转录因子HIF-1α来影响结直肠癌细胞HCT116的铁死亡，这一发现为理解结直肠癌细胞铁死亡的作用机制提供了新的视角。<br>　　（3）抑制NDUFS2能够通过增强铁死亡过程来提高结直肠癌细胞HCT116对索拉非尼的敏感性。这一发现为提高索拉非尼对KRAS突变型的结直肠癌的治疗疗效提供了可靠依据，并为改善KRAS突变型的结直肠癌的化疗疗效的新运用奠定一定的基础。