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摘要皮肤黑色素瘤（SKCM）是一种来源于黑色素细胞的恶性肿瘤，通常发生在皮肤暴露部位，具有高度侵袭性和转移能力。作为全球最为严重的皮肤癌之一，SKCM对人类健康已构成重大威胁。深入探究SKCM的内在分子机制，寻找新的潜在治疗靶点和诊断预后分子标志物等具有重要的现实意义。同源域蛋白同源盒（HOPX）是同源域家族中分子量最小的成员，HOPX参与调节造血干细胞稳态，并与乳腺癌、鼻咽癌、头颈部鳞状细胞癌等肿瘤的发生发展密切相关。然而，HOPX在SKCM中的功能和机制还尚不明确。因此，本研究旨在探究HOPX对皮肤黑色素瘤生长的调控作用及其内在分子机制。<br>　　研究一：探究HOPX基因在SKCM中的表达水平及临床意义。基于TCGA、GEO、HPA数据库分析HOPX在SKCM中的表达水平，并利用cBioPortal数据库分析HOPX与SKCM临床特征相关性。利用UALCAN和TCGA数据库揭示HOPX启动子区域的DNA甲基化修饰水平及修饰位点，并在细胞水平分析DNA甲基转移酶抑制剂对HOPX表达的影响。通过GDSC数据库分析HOPX表达水平与SKCM患者对化疗药物响应程度，并在细胞水平分析过表达HOPX能否增强SKCM细胞对化疗药物的敏感性。研究结果表明：（1）与正常细胞/组织相比，HOPX在SKCM细胞/组织中显著低表达，并在SKCM患者中具有良好的诊断和预后价值；（2）在SKCM中，HOPX基因转录起始位点上游300-800bp高甲基化修饰可能是HOPX在SKCM中低表达的内在原因；（3）SKCM患者中HOPX的表达量与临床SKCM患者对Cisplatin、Tamoxifen等药物的响应程度呈正相关，HOPX可能与SKCM细胞对化疗药物的敏感性相关。<br>　　研究二：探究HOPX对SKCM细胞功能的影响及相关机制。以人皮肤黑色素瘤细胞系A375细胞和A875细胞为研究对象，通过使用CCK-8、EdU染色、集落形成、细胞划痕、Transwell和流式细胞术等方法探究HOPX对SKCM细胞系的增殖、迁移、侵袭以及细胞周期和凋亡的影响。此外，利用WesternBlot检测HOPX对SKCM细胞系内凋亡相关蛋白以及相关信号通路的影响。同时还构建了HOPX过表达的CDX模型，以探究HOPX对裸鼠体内肿瘤生长的影响。研究结果表明：（1）过表达HOPX能够抑制A375细胞和A875细胞的增殖、迁移和侵袭，并促进细胞S期阻滞；（2）过表达HOPX后，A375细胞和A875细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平显著降低，促凋亡蛋白CleavedCaspase3和Bax的表达水平显著升高，此外HOPX能够抑制p38MAPK和PI3K-Akt信号通路激活；（3）CDX模型进一步验证HOPX对裸鼠体内SKCM细胞的生长起抑制作用。<br>　　研究三：探究HOPX与免疫细胞浸润的关系。通过转录组测序和GO/KEGG富集分析，以及基于公共数据库的GSVA分析、免疫相关性分析和单细胞数据分析，探究HOPX与免疫细胞浸润情况及在免疫细胞富集水平。此外，使用人单核细胞白血病细胞系THP-1细胞进一步明确HOPX对巨噬细胞极化的影响。研究结果表明：（1）HOPX正向调控免疫细胞活化，并与B细胞、NK细胞等多种免疫细胞相关，有望成为SKCM的新型免疫检查点；（2）HOPX参与多种免疫细胞浸润，且在T细胞中高度富集；（3）HOPX能够诱导巨噬细胞M1极化，提高炎性因子表达水平。<br>　　综上所述，本研究发现HOPX启动子DNA高甲基化修饰可能是其在SKCM中低表达的内在原因。过表达HOPX能够抑制SKCM细胞的增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡和S期阻滞，并抑制p38MAPK/PI3K-Akt信号通路激活。同时，HOPX能够参与肿瘤免疫浸润，诱导巨噬细胞M1极化，增加炎性因子的表达水平。此外，HOPX能够增强SKCM细胞对临床化疗药物的敏感性，并有望成为SKCM患者的诊断和预后标志物，以及免疫治疗新靶标。研究结果为更好的认识SKCM提供了重要见解，并为临床治疗提供了理论基础。