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川芎嗪抑制NLRP3炎性小体活化减轻肠缺血再灌注损伤细胞焦亡的研究

摘要目的:<br>  评价川芎嗪在小鼠肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤中的作用,并探究川芎嗪是否调控肠I/R时的细胞焦亡及其调控机制。<br>  方法:<br>  选用8周龄,体重20~25g的SPF级雄性C57BL/6小鼠,采用随机数字表法进行分组(n=6)。第一部分,川芎嗪在肠I/R中量效关系探索:假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、I/R+川芎嗪处理组(T组)(川芎嗪剂量从低到高分别为15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg)。第二部分,川芎嗪对肠I/R中细胞焦亡的影响:S组、I/R组、I/R+二甲基亚砜组(DMSO组)、T组和I/R+DMSO+川芎嗪+尼日利亚菌素组(Nigericinsodiumsalt,NSS,T+NSS组)。I/R组、DMSO组、川芎嗪各组和T+NSS组建立肠I/R模型:夹闭肠系膜上动脉(SMA)45min,再灌注2h。S组仅分离SMA不夹闭。T+NSS组于造模前1h腹腔注射NLRP3激动剂NSS4mg/kg(溶于5%DMSO),DMSO组按照10ml/kg给予5%DMSO,川芎嗪各组和T+NSS组于造模前30min腹腔注射川芎嗪。再灌注2h后抽取小鼠心脏血,采用ELISA法测量IL-1β和IL-18浓度。取小肠组织,HE染色在光镜下观察病理学变化,采用Chiu''s评分评估肠黏膜损伤程度。Westernblot法检测小肠组织中细胞焦亡相关蛋白表达水平。<br>  结果:<br>  川芎嗪在肠I/R中量效关系探索:与S组相比,I/R组小肠组织的Chiu''s评分,血浆IL-1β、IL-18表达水平升高(P<0.05)。与I/R组相比,T60、T120组的Chiu''s评分,IL-1β、IL-18水平降低(P<0.05)。与T60组相比,T120组的Chiu''s评分降低(P<0.05),IL-1β、IL-18变化无意义(P>0.05)。后续选择川芎嗪60mg/kg深入研究其对肠I/R损伤细胞焦亡及机制。<br>  川芎嗪对肠I/R损伤细胞焦亡的影响:与S组相比,I/R组小肠组织Chiu''s评分,IL-1β、IL-18表达水平和肠组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平上调(P<0.05)。川芎嗪可降低I/R组的Chiu''s评分,IL-1β、IL-18表达水平和NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平,而NLRP3激动剂NSS可逆转川芎嗪这些作用。<br>  结论:川芎嗪可减轻小鼠肠I/R损伤,保护作用与剂量呈正相关,并在120mg/kg时表现出最佳保护作用。川芎嗪通过抑制NLRP3炎性小体的激活,下调Caspase-1/GSDMD介导的细胞焦亡反应减轻肠I/R损伤。

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导师 冷玉芳
发布时间 2024-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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