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摘要目的：肿瘤研究的疾病模型中，肿瘤细胞系是重要的体外实验模型。肿瘤细胞系不仅为科研人员提供了一个可控的实验模型来研究肿瘤的生物学特性，还对开发新的治疗策略和抗肿瘤药物具有重要意义。壶腹癌占所有壶腹周围肿瘤的20%，近年来壶腹癌的发病率逐年升高。壶腹癌具有明显的异质性和种族差异性。在本研究前没有中国人源壶腹癌细胞系的报道。所以，本课题将建立中国人源的壶腹癌细胞系，填补中国人源壶腹癌细胞系的空白。<br>　　方法：通过对手术切除且术前确诊为壶腹癌的肿瘤组织进行原代培养，建立中国人源的壶腹癌细胞系，待细胞稳定传代20代，进行短串联重复序列(Short Tandem Repeats,STR)鉴定，确认其为新建立的细胞系后，对其生物学特性进行测定，最后进行转录组测序，通过差异分析，差异基因富集分析、蛋白交互作用网络分析、Hub基因的单基因分析等，筛选出具有潜在研究价值的基因。<br>　　结果：通过原代细胞培养和传代细胞培养，新建了三株壶腹癌细胞系，命名为DPC-X1、DPC-X3和DPC-X4，均已稳定传代100代以上，STR检测证明其为未被污染的中国人源壶腹癌细胞系。<br>　　新建立的三株壶腹癌细胞系DPC-X1、DPC-X3和DPC-X4的倍增时间分别为48.1小时、78.8小时和70.1小时。核型分析显示DPC-X1细胞为近4倍体，DPC-X3细胞为近2倍体，DPC-X4细胞为近3倍体。它们接种至基质胶中培养，2周内都可以形成肿瘤类器官。将三株壶腹癌细胞系的肿瘤细胞接种至免疫缺陷小鼠皮下，都能形成异种移植瘤，成瘤率100%。<br>　　三株壶腹癌细胞系DPC-X1、DPC-X3和DPC-X4进行细胞，类器官，移植瘤，原始肿瘤组织的HE染色和免疫组化染色比对，证明同一株细胞系的细胞、类器官，移植瘤，原始肿瘤组织具有相似的形态学特征，且CK7、CK20均呈阳性。通过形态学和免疫组化结果，我们将三株壶腹癌细胞系按病理类型分为：混合型，包含DPC-X1、DPC-X4；肠型，DPC-X3。<br>　　药敏实验显示，DPC-X1、DPC-X3和DPC-X4细胞系对壶腹癌常用化疗药物，奥沙利铂、氟尿嘧啶、吉西他滨、紫杉醇的敏感性差异较大。<br>　　将新建立的三株壶腹癌细胞系进行转录组测序，并按病理类型分为混合型和肠型2组，通过生物信息学分析，筛选出表达上调的20个关键基因和表达下调的20个关键基因，通过Hub基因的单基因分析，进一步筛选出具有潜在研究价值的11个关键基因。<br>　　结论：新建立的三株中国人源壶腹癌细胞系填补了我国壶腹癌细胞系的空白。壶腹癌细胞系的特性分析为我们提供了理解壶腹癌生物学特性的多维度视角。通过深入研究这些细胞系的形态学、生物学、分子遗传特性、药物敏感性和异质性，以及转录组生信分析，我们可以更好地理解壶腹癌的发生、发展和转移机制，为壶腹癌的个性化治疗和药物开发提供重要的科学依据。