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芦竹根多糖的提取分离、结构表征及免疫激活研究

摘要芦竹(ArundodonaxL)是禾本科芦竹属中的一种多年草本植物,广泛分布于中国南方地区,其根部是一种常用的中药,可用于利尿、缓解疲劳、牙痛等症状。芦竹根中富含多种植物化学成分包括三萜类化合物、生物碱、类固醇、多糖等,但具体成分的生理功效还有待研究。多糖作为大分子量物质,具有免疫调节、降血糖、降血脂等多种生理活性,值得深入开发利用。目前国内外关于芦竹根多糖的提取、结构解析及生理活性的研究还未见报道。因此,本文以芦竹根为研究对象,对其多糖进行提取纯化工艺研究,并表征其结构,评价其免疫增强活性,具体内容如下:<br>  1.本研究通过超声辅助提取法对芦竹根中的多糖进行提取,经单因素实验和响应面实验优化超声提取工艺,确定了芦竹根多糖在超声温度为79℃、超声时间62min、料液比1∶21g/mL为最佳提取工艺,其得率可达1.75%。粗多糖经过阴离子交换柱DEAE-52洗脱得到电荷均一的多糖组分,再经凝胶柱SephadexG-100纯化得到分子量大小均匀的多糖组分,并命名为ADLP。<br>  2.通过GPC测定ADLP分子量为17014Da,利用GC-MS测得该多糖是一种仅含葡萄糖的同质多糖。ADLP的红外光谱在3288cm-1和848cm-1处出现了吸收峰,表明ADLP具有明显的多糖结构,且含有α型糖苷键。核磁图谱表明,ADLP主要骨架单元为→3)-α-D-Glcp(1→3)-α-D-Glcp(1→。扫描电镜显示ADLP具有片状、棒状和球状结构,且空间构象蓬松。此外,刚果红实验表明ADLP不含三螺旋结构。<br>  3.通过巨噬细胞RAW264.7评价了ADLP的免疫激活功能。结果显示,当ADLP浓度达到50μg/mL时,可有效促进巨噬细胞RAW264.7增殖,ADLP还可以诱导巨噬细胞RAW264.7对NO和细胞因子1L-1β的分泌。中性红吞噬实验表明ADLP能够增强巨噬细胞的吞噬功能。以上实验表明ADLP浓度达到50μg/mL后,具有明显的免疫增强作用。<br>  本研究利用超声辅助提取法,并结合二级柱层析,获得了均一芦竹根多糖ADLP,并明确了其结构特征,证实了ADLP具有良好的免疫增强功能,为芦竹根多糖的进一步开发和利用提供了实验基础。

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导师 刘克海
分类号 R284
发布时间 2024-11-19
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