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摘要目的：食管癌是预后较差的恶性肿瘤之一，而食管鳞癌在我国食管癌患者中占主导地位。生殖细胞特异性基因2型蛋白（GSG2）在细胞生长和肿瘤进展中具有重要作用。本文将研究GSG2在食管鳞癌组织及癌旁正常组织中的表达水平及其临床意义，并通过体内外实验探讨GSG2对食管鳞癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响，以及探究GSG2调控食管鳞癌细胞中信号通路的潜在分子机制。<br>　　方法：1、收集98例食管鳞状细胞癌患者的临床资料。免疫组化测定食管癌组织及癌旁正常组织中GSG2表达的差异，统计分析GSG2的表达水平与各病理参数等临床资料的相关性。初步检测GSG2基因在正常人食管细胞系及不同食管鳞癌细胞系中的表达情况。2、首先构建利用慢病毒敲低GSG2表达的食管鳞细胞模型。然后采用qRT-PCR、Western blot实验验证实验组与阴性对照组食管鳞细胞中GSG2表达水平的差异；MTT实验检测两组细胞的增殖活力；克隆实验检测两组细胞的集落形成能力；流式细胞术探究两组细胞的凋亡情况；细胞划痕实验及迁移实验验证两组细胞侵袭的差异。3、将用慢病毒感染的稳转细胞接种至裸鼠，构建裸鼠移植瘤模型。采用体内成像系统观察肿瘤荧光总辐射效率；检测各肿瘤组织体积、重量；通过Ki67免疫组化病理染色，评估GSG2敲低后肿瘤组织增殖的恶性程度。4、利用人凋亡抗体阵列检测食管鳞细胞GSG2敲低后细胞凋亡相关蛋白表达的变化；Western blot实验检测食管鳞细胞GSG2敲低后下游通路蛋白表达的变化情况。<br>　　结果：1、免疫组化分析显示GSG2在食管鳞癌组织中高表达，明显高于癌旁正常组织，并且GSG2的表达与肿瘤分期、病理分级、阳性淋巴结数量等均存在显著相关性。qRT-PCR及Western blot检测显示相对于人食管上皮细胞HEEC细胞，GSG2基因在食管鳞癌细胞Eca-109、TE-1、EC9706及KYSE450中的表达相对较高（P＜0.01），其中细胞系Eca-109和TE-1相对表达量最高。2、成功构建了用慢病毒敲低GSG2表达的Eca-109及TE-1细胞模型。MTT法检测显示敲低GSG2的食管鳞癌细胞增殖活力受到明显抑制（P＜0.001）；克隆形成实验显示在GSG2敲低后，细胞集落形成数量减少、集落直径更小（P＜0.001）；流式细胞术显示敲低GSG2的细胞组凋亡率明显增高（P＜0.001）；划痕试验和Transwell试验显示敲低GSG2后细胞迁移率下降明显，迁移能力明显降低（P＜0.001，P＜0.01）。3、我们构建了裸鼠食管鳞癌移植瘤模型。体内成像系统观察显示，敲低GSG2的食管鳞癌皮下移植瘤总的荧光强度明显减弱（P＜0.05），而且皮下移植瘤的体积和重量明显降低。Ki67免疫组化染色显示， GSG2敲低后肿瘤组织的Ki67阳性率明显降低，增殖指数减低（P＜0.001）。4、通过人凋亡抗体阵列分析显示，在GSG2敲低后，食管癌细胞Eca-109中显著下调的凋亡蛋白包括IGF-Ⅱ、Survivin、TRAILR-4和XIAP。Western blot结果显示，GSG2敲低后，Eca-109细胞下游通路蛋白中Akt、p-Akt、Cyclin D1和CDK6蛋白表达下调，而MAPK9蛋白表达则上调。<br>　　结论：GSG2在食管鳞癌组织中呈高表达状态，而癌旁正常组织中低表达，并且其表达水平与肿瘤分期、病理分级、阳性淋巴结数量等临床病理特征密切相关。下调GSG2表达可显著影响食管鳞癌细胞的多种恶性生物学行为，如抑制细胞增殖、减少集落形成、促进细胞凋亡、阻碍细胞迁移等。GSG2可通过调控食管鳞癌细胞凋亡信号通路中的部分抗凋亡蛋白及部分下游通路蛋白的表达，从而影响癌细胞的增殖、凋亡等生物学行为。综上所述，GSG2参与了食管鳞癌的进展，对预测食管鳞癌患者的恶性程度具有重要临床意义，并可为今后食管鳞癌的治疗提供一个潜在的分子靶点。