检索历史 清除

摘要背景:<br>　　下腰痛（Low back pain，LBP）是全球上造成残疾的最大原因之一，而椎间盘退变（Intervertebral disc degeneration，IVDD）是下腰痛的主要病因。目前IVDD的机制复杂，在治疗上都不能针对退变的根本原因，无法阻止疾病进展或逆转退变已恢复椎间盘先前功能的能力。细胞衰老被认为是许多慢性退行性疾病的重要原因之一，包括IVDD，所以靶向髓核细胞衰老可能是治疗IVDD的一种有效途径。NDUFA4L2是呼吸复合体Ⅰ的一个亚基，它限制了该复合体的活性和线粒体活性氧（Mitochondrial reactive oxygen species，mtROS）的产生，对线粒体功能起重要的调控作用。此外，线粒体功能障碍既是细胞衰老的原因，也是衰老的结果。但线粒体NDUFA4L2蛋白、线粒体功能障碍、髓核衰老细胞之间关系尚不明确。<br>　　目的:<br>　　本研究旨在探讨线粒体NDUFA4L2蛋白在椎间盘退变中的调控作用<br>　　方法:<br>　　1、利用GEO数据库中椎间盘单细胞转录组数据GSE165722进行分析，寻找低退变组与高退变组中差异基因NDUFA4L2。<br>　　2、利用组织染色、免疫组化检测NDUFA4L2蛋白在低退变组与高退变组中的表达情况。<br>　　3、利用CCK8实验检测H2O2的浓度，随后利用H2O2诱导髓核细胞，建立髓核细胞衰老及铁死亡模型。<br>　　4、利用Western blot实验检测NDUFA4L2在低退变组与高退变组中的表达情况。<br>　　5、用慢病毒与siRNA构建高表达及低表达NDUFA4L2的髓核细胞。<br>　　6、利用SA-β-Gal衰老染色实验及铁死亡相关染色实验等方法，分析过表达N DUFA4L2对髓核细胞衰老及铁死亡的影响。<br>　　结果:<br>　　1、我们的研究显示了NDUFA4L2在椎间盘退变表达下降，与椎间盘退变程度呈负相关。<br>　　2、利用100μM、200μM浓度的H2O2诱导髓核细胞，成功构建髓核细胞衰老及铁死亡模型。<br>　　3、成功构建了NDUFA4L2低表达及过表达的髓核细胞。<br>　　4、NDUFA4L2过表达能够抑制髓核细胞的衰老以及铁死亡，从而缓解椎间盘退变的进展。<br>　　结论:<br>　　NDUFA4L2的表达与椎间盘退变程度呈负相关，能够抑制髓核细胞的衰老以及铁死亡，从而缓解椎间盘退变的进展。