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摘要慢性伤口一直是创伤治疗领域的重大挑战，导致伤口慢性愈合的原因有渗出液污染、细菌感染和免疫调节功能紊乱等。伤口渗出液污染导致细菌感染，进而形成伤口长期的炎症反应，严重的细菌感染容易进一步引发脓毒症。因此及时清理伤口渗出液、抑制细菌感染以及促进伤口愈合是治疗慢性伤口的关键。为了解决伤口愈合过程中失血和耐药菌感染的问题，本课题采用OBOC法与细胞膜色谱法相结合制备并筛选出凝血肽和抗菌肽，在此基础上对抗菌肽的抗菌性能进一步优化，并制备了大孔径明胶水凝胶与肽结合用以慢性伤口愈合的治疗。具体的研究内容如下：<br>　　1．制备高柱效且稳定的细胞膜色谱。以改进溶胶-凝胶法制备粒径在 3-4 μm 的SiO2微球。通过光敏重氮树脂将细菌膜和红细胞膜以共价键键合到SiO2微球上得到细胞膜色谱填料，此方法具有高效稳定的特点。以OBOC法合成肽库，通过细胞膜色谱结合简易筛选实验从肽库中筛选功能多肽，此方法具有简单、高效、快速的特点。<br>　　2．筛选制备快速止血功能的凝血肽。该肽的序列为 KFVLK，可在 5 s 内快速凝血，对于断尾和肝出血这类较大伤口出血，KFVLK 可在短时间内阻止出血并极大减少出血量。24 h内的成纤维细胞迁移率达88%，具有一定促进伤口愈合的能力。<br>　　3．筛选制备可抑制脓毒症的抗菌肽。该肽的序列为 LKAHR，具有良好的抗耐药性能，在小鼠脓毒症模型中表现出了抑制体内感染恶化的能力。采用冷冻法制备膨胀率达 3145%的明胶水凝胶负载 LKAHR用于伤口愈合，清除伤口渗出液的同时可以及时清除伤口处细菌感染并促进伤口愈合。<br>　　4．筛选制备具有抗氧化性能改性的抗菌肽。以半胱氨酸和烷基长链对LKAHR进一步改性优化，经过筛选得到最优改性抗菌肽 Cys2-LKAHR-C8。改性后抗菌性能平均提升50%，并且具有良好的抗氧化能力。通过PEG改性增强明胶水凝胶的机械性能并用负载 Cys2-LKAHR-C8 治疗慢性伤口，在小鼠烫伤伤口感染模型中表现出了稳定的抑菌能力和优异伤口愈合性能。<br>　　综上所述，我们通过OBOC法结合细胞膜色谱法快速筛选制备了可快速凝血的凝血肽和广谱抗菌性的抗菌肽，抗菌肽具有良好的抗耐药性且对脓毒症具有抑制作用，经过改性后的抗菌肽抗菌能力提升的同时具备了抗氧化能力，负载功能肽的高膨胀率明胶水凝胶在慢性伤口愈合中表现出良好的促愈合性能。