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摘要NBCn1（ElectroneutralNa+-bicarbonatecotransporter1）是电中性的离子转运体，由Slc4a7基因编码，属于SLC4（SoluteCarrier4）家族，以1∶1的表观化学计量比协同转运Na+和HCO3-。NBCn1在机体内广泛表达分布，参与维持机体的酸碱稳态和水盐平衡。遗传学研究表明，NBCn1功能失常与高血压、乳腺癌等疾病密切相关。Slc4a7基因有两个不同的启动子，此外还有6个可选择性剪接的外显子，可以表达产生许多不同的异构体，目前已经发现的NBCn1异构体产物已有20多种。CassetteⅡ是NBCn1中最大的可变结构域（含123个残基酸残基），由第9号外显子编码。这里“可变”的意思是指由于外显子的选择性剪接导致CassetteⅡ只在特定NBCn1异构体中存在。目前，CassetteⅡ表达分布的组织特异性还不太明确，其分子功能也不清楚。<br>　　本研究首先利用RT-PCR技术对CassetteⅡ在大鼠组织中的表达分布进行了研究。结果显示，在mRNA水平上，CassetteⅡ主要在大鼠心脏和骨骼肌组织中有丰富的表达，在十二指肠、子宫组织中有微弱的表达，而在脑、肾脏、脾脏和肺等组织中没有明显表达。<br>　　我们进一步制备了针对CassetteⅡ的多克隆抗体。利用该抗体，通过免疫印迹实验在蛋白水平检测CassetteⅡ在组织中的表达分布。结果发现，CassetteⅡ在大鼠心肌及骨骼肌组织中有较丰富的表达，在脑、肾脏、脾脏、肺、肝脏等其他组织中未见明显的表达。在小鼠组织中也得到了类似的结果。蛋白表达分析结果与RT-PCR结果基本一致。<br>　　电中性的NBCn1其离子转运活动没有跨膜电流产生。NBCe1是生电性（electrogenic）的Na+-HCO3?共转运体，由Slc4a4基因编码，在结构上与NBCn1高度保守。NBCe1以1∶3或1∶2的表观化学计量比协同转运Na+和HCO3?，其离子转运活动会产生跨膜电流，通过电压钳测定NBCe1依赖的电流可表征其转运活性。本研究利用NBCe1的生电性特征及其结构上与NBCn1的保守性，对CassetteⅡ的分子功能进行初步探究。将CassetteⅡ引入NBCe1的同源位置，构建嵌合体，并通过电压钳分析嵌合体的活性。结果表明，引入CassetteⅡ对NBCe1的活性产生非常显著的抑制效应。基于NBCn1与NBCe1在结构上的高度保守性，可以合理推测CassetteⅡ对NBCn1也具有类似的抑制效应。CassetteⅡ抑制NBC活性的具体机制还需进一步研究。<br>　　综上，通过本研究获得了以下发现：（1）含CassetteⅡ的NBCn1主要表达在心脏和骨骼肌组织中；（2）通过构建嵌合体发现CassetteⅡ对NBCe1的活性具有显著的抑制效应。这些研究对深入理解CassetteⅡ的生理学作用和NBCn1的功能调控机制具有重要的意义。