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摘要背景：<br>　　脊髓损伤可以分为原发性损伤与继发性损伤。原发性损伤通常来源于直接外力，无法预知且无有效的治疗方法。继发性损伤是在原发性损伤的基础上由于水肿、缺血、缺氧、炎症等病理生理过程导致的脊髓组织损伤，是一种细胞及分子水平的调控过程，如何减轻继发性损伤是SCI治疗的关键。Treg细胞，是CD4+T淋巴细胞的一个亚群，以高表达CD25，叉头盒p3(Foxp3)为特征，其被广泛认为对于维持免疫稳态和预防自身免疫具有非常重要的作用。越来越多的证据表明，Treg细胞在多种组织疾病后的修复过程中发挥了作用，然而Treg在脊髓中，尤其是继发性脊髓损伤中发挥的作用，尚不清楚。<br>　　目的：<br>　　研究Treg细胞在损伤脊髓内的数量变化及时空分布情况，分析脊髓损伤后急性期与慢性期组织驻留Treg的功能及其作用机制。<br>　　方法：<br>　　我们使用免疫荧光，流式细胞学检测等方法研究Treg细胞在损伤脊髓内的数量变化及时空分布情况；使用单细胞RNA测序及转录组测序分析脊髓损伤后慢性期驻留Treg的功能；使用Foxp3-DTR基因鼠进行脊髓损伤造模，并进行行为学评分，判断Treg细胞在脊髓损伤后的作用。我们使用PLX5622耗竭小鼠体内小胶质细胞，判断Treg细胞与小胶质细胞的关系。使用Cx3cr1CreER鼠与Abcg1f/f鼠配繁，获得小胶质细胞中条件性敲除Abcg1基因的小鼠，以此验证Treg细胞在脊髓中通过调控小胶质细胞Abcg1基因的表达发挥神经保护作用。<br>　　结果：<br>　　我们发现脊髓内Treg细胞比例在损伤后3天内迅速增加，并在14天时达到峰值，28天时略有下降；脊髓损伤3天后，Treg细胞先弥散在损伤中心位置，后逐渐向损伤周围区域浸润，数量明显增多。进一步使用Foxp3-DTR基因鼠进行脊髓损伤造模，并进行行为学评分，我们发现Treg细胞对于小鼠脊髓损伤后运动功能的恢复是必要的。我们使用单细胞测序及转录组测序来进一步了解Treg细胞在脊髓内的数量变化与转录组特征，结果表明：Treg细胞聚集于损伤脊髓内并拥有独特的转录组特征，包括“小胶质细胞激活”，“对吞噬的正向调控”，“免疫反应过程”等方面的基因表现出显著的富集。进一步的，我们使用PLX5622耗竭小鼠体内小胶质细胞，结果表明，缺乏小胶质细胞不仅影响了小鼠脊髓损伤修复，同时对于Treg细胞原有的神经保护功能产生了影响，这反映了Treg细胞依赖于小胶质细胞发挥神经保护功能。Treg细胞-小胶质细胞共培养结果表明，Treg细胞对小胶质细胞的胆固醇代谢与M2极化表型产生了影响。使用转录组测序及Cx3cr1CreERAbcg1f/f鼠，我们发现了Treg细胞主要通过上调小胶质细胞Abcg1基因，调控小胶质细胞在脊髓损伤环境中的胆固醇代谢及促进小胶质细胞M2表型发挥作用。<br>　　结论：<br>　　本研究首次关注了脊髓损伤后Treg细胞在脊髓内的数量与位置随时间变化的情况并分析了脊髓内驻留Treg细胞的转录组特征，证明了脊髓内Treg细胞在脊髓损伤后具有神经保护功能，并主要通过调控小胶质细胞Abcg1基因介导的胆固醇代谢发挥作用。该发现有望作为脊髓损伤后免疫治疗的新思路。