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果蝇体内多聚磷酸盐的检测

摘要多聚磷酸盐在原核生物和真核生物中普遍存在,它是由无机磷酸盐线性排列组成,其结构简单,在细胞中具有不同作用。在先前的研究中表明多聚磷酸盐在单细胞生物中具有多种功能,包括能量、磷酸盐储存、阳离子螯合、应激保护、细胞周期进程、蛋白质折叠和信号传导。在多细胞动物中,细胞外多聚磷酸盐参与多种功能,包括炎症、凝血和蛋白质聚集。此外,细胞内多聚磷酸盐还与细胞分化、转录调控、细胞信号传导和 DNA 修复有关。在对人类疾病的研究过程中发现,在一些神经系统性疾病中有多聚磷酸盐的存在,包括阿尔茨海默症(Alzheimer''s Disease,AD)、肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic Lateral Sclerosis,ALS)和帕金森(Parkinson''s disease,PD)。在家族性和散发性 ALS脑脊液及脊髓切片显示多聚磷酸盐浓度增加,在星形胶质细胞质中,多聚磷酸盐水平有所增加。目前,多聚磷酸盐存在对于神经系统疾病是有益还是增加细胞毒性尚未有定论;同时对于动物体多聚磷酸盐分布及参与调控多聚磷酸盐的因素了解不清楚,主要是多聚磷酸盐研究手段有限,分辨率不足。<br>  本研究拟以多种神经退行性疾病的果蝇作为模式系统研究多聚磷酸盐在这些疾病中的作用。我们利用 Escherichia coli str. K-12大肠杆菌的 PPX水解酶的C 端多聚磷酸盐结合结构域,通过诱导表达及蛋白纯化的方法制作多聚磷酸盐的检测探针,拟对各种退行性神经系统疾病果蝇模型大脑的多聚磷酸盐进行检测分析。<br>  使用该探针,我们成功在野生型及 PXo 突变体果蝇的大脑及肌肉细胞中检测到了多聚磷酸盐,同时还发现 PXo 突变体果蝇大脑及肌肉细胞中有明显的多聚磷酸盐的积累。这为我们进一步研究多聚磷酸盐奠定了基础。

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导师 金珊
发布时间 2024-12-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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