摘要益生菌在保障人类健康及疾病治疗方面有着重要作用,例如口服益生菌疗法可以有效预防和治疗由肠道菌群失调所引起的各类疾病。但是,胃肠道的恶劣环境使大量益生菌在作用过程中失活,最终导致该疗法治疗效果不佳。微胶囊技术和细菌纳米封装技术已被应用于保护益生菌免受胃肠道恶劣环境的影响,从而改善益生菌的口服递送。然而,传统方法所制备的微胶囊存在粒径难以控制的缺点,纳米涂层技术在益生菌到达其目标位点之前只能提供短暂的保护。因此,迫切地需要开发一种尺寸可控且稳定封装益生菌的微囊制备方法,实现益生菌的有效保护。自2000年以来,液滴微流控技术已经成为一个快速发展并且越来越受欢迎的研究领域,基于液滴微流控技术能够产生结构稳定且尺寸均匀的单分散液滴,并可以对其进行精确的控制和操作,液滴微流控技术是制造具有均匀尺寸微胶囊的有效方法。基于以上背景,本研究制备了一种肠道靶向递送益生菌微胶囊,选取乳杆菌(LAB)作为模型益生菌,通过将细菌纳米封装技术和微胶囊技术结合,制备了壳聚糖(CS)和聚多巴胺(PDA)涂层封装的益生菌 CS@PDA-LAB,并将其包封在基于液滴微流控技术所制备的海藻酸钙微胶囊中,用于改善益生菌的口服递送。<br> 体外实验表明,微胶囊包封后CS@PDA-LAB在模拟胃液(SGF,pH=2)中的存活率远高于原始LAB。同时,在模拟肠液(SIF,pH = 6.8)中,微胶囊经过3 h将益生菌基本完全释放。综上所述,本研究所制备的微胶囊形状大小高度均匀,解决了传统方法制备中微胶囊粒径难以控制的难题,并且为涂层益生菌提供长时间的保护,同时也利用所修饰的涂层弥补海藻酸钙微胶囊高孔隙率的缺点,为改善益生菌的口服递送提供了一种新的思路。<br> 本研究取得的成果如下:<br> 1.本研究通过多巴胺(DA)的自氧化和自聚合在益生菌表面形成聚多巴胺涂层并将壳聚糖掺杂其中制备了涂层益生菌CS@PDA-LAB,通过扫描电子显微镜(SEM)等方法验证了涂层的成功修饰。该涂层对益生菌的存活率影响较小,但是会对其产生一定的生长延迟。<br> 2.本研究设计并组装了用于生成油包水型(W/O)单乳液滴的毛细管微流控装置,通过调整内外相流速比以及材料浓度成功制备了形状、大小可控,且具有pH响应的海藻酸钙微胶囊。当内相海藻酸钠浓度为1 wt%、Ca-EDTA浓度为25 mM、外相乙酸浓度为0.1%(V/V),调整内外相流速分别为1 μL/min和60 μL/min时,可制备形状大小高度均匀的海藻酸钙微胶囊。<br> 3.本研究将涂层益生菌包封在具有pH响应性的海藻酸钙微胶囊中,该微胶囊在模拟胃液中表现为海藻酸钙水凝胶,保护涂层益生菌;在模拟肠液中表现为Ca-EDTA溶液,从而释放涂层益生菌。同时,涂层的修饰也成功提高了益生菌在海藻酸钙微胶囊中的包封效率。
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