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摘要硝基化合物包括硝基芳烃、硝基多环芳烃等，在环境中广泛分布，主要来源于工业染料、农药和塑料制造等人类生产活动中。然而，许多硝基化合物属于诱变剂，如2-硝基芴(2-NF)、5-硝基苊(5-NA)和1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)等。这些物质能直接或间接造成DNA损伤，引发遗传毒性效应，严重威胁人类健康安全。已有的遗传毒性检测方法存在实验安全性要求高、检测时间长和检测方法步骤复杂等缺点。<br>　　本研究基于DNA损伤应激修复机制，利用启动子PumuDC和SRRz裂解蛋白作为报告系统，同时根据硝基化合物的代谢途径引入硝基还原酶A(NRA)、O-乙酰转移酶(OAT)、磺基转移酶(SULT1A1、SULT1A2)的编码基因，构建出7株大肠杆菌遗传毒性检测菌株。利用4种已知遗传毒性的硝基化合物探究菌株的有效性、灵敏性。结果表明，共表达NRA、OAT的菌株(NaOaUs )和共表达NRA、SULT的菌株(NaS1Us、NaS2Us)可对这些化合物响应，且比其余菌株响应时间短、灵敏度高。NaOaUs对1-硝基萘(1-NN)、2-NF、5-NA的检测限分别为0.716μM、0.009μM和1.508μM，与传统SOS/umu试验菌株灵敏度相当，而NaS1Us、NaS2Us对1-NN的检测限为2.409μM、2.512μM，对MNNG的检测限分别为0.088μM、0.129μM，灵敏度均优于传统SOS/umu试验菌株。检测菌株与受试硝基化合物共孵育2小时后，即可肉眼看出菌液澄清度的变化。表明本研究构建的重组菌，尤其是共表达双酶的重组菌对硝基化合物敏感，在2小时检测出结果，比传统的SOS/umu试验检测时间更短。<br>　　最后，使用构建的7株重组菌与对照菌株Us对20种渔药进行了遗传毒性初筛。20种渔药中，有5种为硝基化合物，8种为其它含氮有机化合物，NaOaUs、NaS1Us、NaS2Us对这5种硝基化合物和5种其它含氮有机化合物均能响应，说明该系统适用于硝基化合物遗传毒性筛查，也适用于其它含氮有机化合物的遗传毒性筛查。进一步分析渔药结构与菌株响应度发现，在能量最低分子构象中，渔药分子中取代基与芳香环位于同一平面时，菌株更可能灵敏响应。<br>　　综上所述，本课题针对硝基化合物构建了安全、简便、灵敏的遗传毒性检测体系，同时可应用到渔药遗传毒性初筛中。