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经典名方一贯煎的制备工艺、质量标准及对Ⅱ型糖尿病大鼠的药效研究

摘要经典名方,凝聚了中华民族的医药学成就,蕴含着丰富的用药经验,是中华民族传统文化的重要组成部分。国家明确了相关的政策,经典名方类中药按照简化标准审评审批,鼓励运用现代科学技术研究开发传统中成药,并加强中药质量控制,旨在推进古代经典名方向新药转化。本课题开展经典名方一贯煎研究,主要包括一贯煎制备工艺研究、质量标准研究和Ⅱ型糖尿病大鼠的药效学研究。<br>  1一贯煎制备工艺研究<br>  对处方中各药材的有效成分及使用特点进行综合性分析,采用水煎提取法。用单因素法对煎煮前浸泡时间、加水量、煎煮时间进行考察。得最佳煎煮工艺为:取处方量饮片,加水500mL,然后浸泡60min,武火(2000w)煮至沸腾,文火(600w)保持微沸40min,趁热滤过,剩下的药渣加水500mL,武火(2000w)煮至沸腾,文火(600w)保持微沸40min,趁热滤过,合并滤液,即得一贯煎煎液。对浓缩温度、浓缩时间进行单因素考察,确定浓缩工艺为减压浓缩温度不超过65℃,浓缩时间不宜超过4h。取单倍处方量浓缩液(约100mL,预冻液体厚度≤10mm),于-70℃下预冻4-6h,真空冷冻干燥60h,即得一贯煎冻干粉。<br>  2一贯煎质量标准研究<br>  采用薄层色谱法对一贯煎基准样品中含有的阿魏酸、藁本内酯、当归对照药材、川楝素、川楝子对照药材进行鉴别研究,建立的方法简便准确,并排除了阴性样品色谱干扰。通过HPLC法建立一贯煎基准样品HPLC指纹图谱,最终结果显示:15批供试品色谱图中都有8个共有特征峰,并与参照物色谱图中的阿魏酸特征峰、毛蕊花糖苷特征峰保留时间相对应,以阿魏酸参照物峰相对应的峰为S峰,以S峰为基准计算各个特征峰的相对保留时间。8个共有特征峰的相对保留时间平均值分别为:0.16(峰1)、0.45(峰2)、0.89(峰3)、0.93(峰4)、1.00(峰5)、1.02(峰6)、1.07(峰7)、1.13(峰8)。15批供试品色谱中各特征峰与S峰的相对保留时间均在平均值的±10%范围内。结合保留时间和紫外吸收,通过对比分析,峰3为麦冬专属,峰7为枸杞子专属,峰6、峰8(毛蕊花糖苷)为地黄专属。测定15批一贯煎物质基准中2个指标性成分及总多糖含量,其中阿魏酸含量在0.220mg/g~0.362mg/g,平均值为0.309mg/g,毛蕊花糖苷含量在0.105mg/g~0.195mg/g,平均值为0.150mg/g,总多糖含量在559.31~677.84mg/g,平均值为624.62mg/g,各批次都符合标准(±30%)。15批一贯煎出膏率范围为38.30%~43.82%,平均值为40.86%。从饮片到基准样品转移率较为稳定。<br>  3一贯煎对Ⅱ型糖尿病大鼠的改善作用<br>  基于高糖高脂饮食联合STZ诱导Ⅱ型糖尿病动物模型探讨一贯煎对血糖、血脂、认知功能等方面的改善作用,血糖高于16.7视为造模成功,把大鼠分为空白组、模型组、阳性药组(250mg/kg/d二甲双胍)、一贯煎低、高剂量组(3.465/6.93g/kg/d一贯煎基准样品),给药8周,灌胃给药,定期检测体重及空腹血糖,进行Morris水迷宫实验,解剖后通过试剂盒检测、病理切片、WB等技术检测大鼠体内血脂血糖代谢情况及炎症因子的表达,观察海马组织神经元形态和细胞活力。结果显示,一贯煎可显著降低Ⅱ型糖尿病大鼠的血糖水平,并对Ⅱ型糖尿病大鼠减轻体重的症状有表现出改善作用。一贯煎降低了糖化血红蛋白、胰岛素及IR水平,进一步说明了一贯煎可在一定程度上调节Ⅱ型糖尿病大鼠的血糖及胰岛素水平。此外,一贯煎还具有改善Ⅱ型糖尿病伴随的高血脂的症状。行为学实验中,一贯煎给药的大鼠学习记忆能力显著高于模型组,对Ⅱ型糖尿病具有较好的改善作用。海马体的切片及HE、尼式染色证明一贯煎具有一定的神经保护作用。ELISA试剂盒检测、WB的检测结果显示研究证明一贯煎可降低海马体中的Tau蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18的表达。一贯煎可能通过降血糖、降血脂、改善胰岛素抵抗、氧化应激、神经炎症等对Ⅱ型糖尿病产生影响。

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导师 张海燕
学位信息:
江西中医药大学 中药学 中药学(硕士) 2024年
发布时间 2025-03-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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