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摘要男性生育力下降已成为现代世界的一个社会学和医学问题。目前用于评估男性精液质量的常规方法通常难以准确的判断男性不育的具体病因。近年来很多研究表明，蛋白质的糖基化修饰参与精子发生、成熟、获能、免疫、精卵识别和融合及整个受精过程，且精浆中的糖蛋白和聚糖在精子成熟、维持精子结构稳态、精子获能和调节免疫反应等方面发挥着重要作用。因此精子和精浆中的蛋白质糖基化异常都可能导致精子功能异常甚至不育症的发生。目前，基于生物质谱的糖蛋白组学研究已经在男性精液中得到了应用，然而这些研究仅单独针对糖链或去糖基化多肽，无法实现精子或精浆中糖蛋白及糖基化位点与其对应糖链结构间相互关系的深度分析。因此，采用新的方法分析完整糖肽中包含的位点特异性糖链结构对于揭示不育症男性精子功能障碍等具有重要意义。<br>　　本研究基于完整糖肽水平的先进糖蛋白组学方法，对健康可育、弱精症和体外受精（IVF）失败的男性精子和精浆中完整糖肽及位点特异性糖链结构的差异表达水平进行深度分析。针对精子的研究结果表明，含 LacdiNAc、Lewisx和 Lewisy的糖链结构在弱精症和IVF失败男性精子中均明显下调，并且含Lewisx糖链和含Lewisy糖链的下调可能影响精子的免疫调节反应，阻碍受精级联反应的顺利进行。进一步的验证结果表明LacdiNAc结构在弱精症男性精子中特异性下调，可作为诊断弱精症的潜在生物标志物。针对精浆的研究结果表明，弱精症和IVF失败男性精浆中含有更多的岩藻糖修饰，这部分岩藻糖主要是仅被核心岩藻糖修饰的糖链和分支结构为Lewisx/y的糖链。此外，岩藻糖和 Lewisy结构在弱精症和 IVF 失败男性精浆中的上调可能干扰了精子表面成分，并影响了其对于免疫反应的正常调节。在弱精症和IVF失败男性精浆中均筛选到3个具有精囊特异性的差异糖蛋白（FN1、SEMG2 和 PAEP），并对其上异常表达的位点特异性糖链结构进行了解析，为后续男性不育症的诊断和标志物的发现提供一定的数据支持。通过比较分析不育症男性精子和精浆中的位点特异性N-糖基化差异表明，精浆比精子中含有更多的N-糖基化糖蛋白，且具有更为复杂的糖链结构；另外，CLU、FN1、LTF和PIP糖蛋白在弱精症和IVF失败男性精子和精浆中均表现出明显的异常糖基化，且这种糖基化异常可能与不育症的发生有着相当密切的联系。<br>　　综上所述，本研究揭示了弱精症和IVF失败男性精子中含LacdiNAc和/或Lewisx/y位点特异性糖链降低和精浆中岩藻糖含量和Lewisy结构升高，对不育症男性精子功能造成的可能影响。不育症男性精浆中生物标志物糖蛋白（FN1、SEMG2和PAEP）上的位点特异性糖链结构的改变可能有助于男性不育症的诊断和病因分析。同时不育症男性精子和精浆中的糖蛋白质组数据的综合分析揭示了糖基化修饰水平在不育症男性精子和精浆中的异同。该数据结果将为进一步揭示含LacdiNAc和/或Lewisx/y糖链以及其他特征性糖链/糖蛋白在男性精子功能的调控及精子功能障碍的发病机制奠定了基础，并为男性不育症的病因诊断及可能治疗靶点提供了新思路。