摘要山萸肉为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉,具有收涩固脱、补益肝肾等功效。现代药理研究表明,山茱萸具有降血糖、抗氧化、抗癌、抗炎、保肝、抗菌活性、神经保护及抗骨质疏松等多种药理活性。其中山茱萸环烯醚萜苷是山茱萸中主要活性成分群,口服进入人体后,可发生降解、吸收、分布和代谢等过程,最终可经粪便和尿液排出,具有非常重要的研究意义。本研究拟以山茱萸总苷粗提物和纯化的山茱萸总苷为研究对象,利用动物实验,采用HPLC分析技术,考察山茱萸环烯醚萜苷在尿中的代谢及其对大鼠尿液成分的影响,为进一步研究山茱萸功效物质及其潜在生物活性提供基础。研究内容包括:<br> (1)建立山茱萸主成分 HPLC 分析方法:通过优化及方法学考察,建立了山茱萸主成分HPLC分析方法,同时,通过正交实验,确定了分析用样品制备方法为:80%甲醇提取、料液比1∶90,超声时间 90 min,超声功率 150 W。<br> (2)制备山茱萸环烯醚萜苷粗提物及纯化的山茱萸总苷溶液:采用 30%乙醇提取法和大孔吸附树脂法制备了山茱萸提取物及山茱萸总苷溶液(每 1 mL 溶液含相当 1 g药材),经HPLC 法分析,山茱萸提取物中莫诺苷、马钱苷、山茱萸新苷 I含量分别为226.36 μg/mL、104.47 μg/mL、43.81 μg/mL,出膏率为 55.37%±0.73%。20%乙醇洗脱液中莫诺苷206.81 μg/mL、马钱苷89.87 μg/mL,50%乙醇洗脱液中山茱萸新苷I21.13 μg/mL。<br> (3)观察动物实验一般指标:SD大鼠分别灌胃给予山茱萸提取物和山茱萸总苷溶液低、中、高剂量,连续4天,结果显示山茱萸提取物与山茱萸环烯醚萜苷可促进大鼠饮水及排尿,对大鼠有一定的减重作用,并以山茱萸环烯醚萜苷的作用更加明显,但对粪便含水量无影响。<br> (4)考察大鼠尿液中山茱萸提取物及山茱萸总苷代谢产物生成:利用HPLC,分析大鼠尿液乙酸乙酯萃取物和水溶性部分中的成分,其中乙酸乙酯萃取物未见原主成分和新生代谢产物。但水溶性部分中检测出微量莫诺苷、马钱苷原型及代谢峰(新峰)。尿液PCA分析显示,正常组与山茱萸提取物组无明显差异,但与山茱萸总苷组有一定差异,提示纯化后总苷的活性可能更强。<br> 综上所述,本研究建立了分析山茱萸主成分的HPLC方法,建立了提取、纯化山茱萸环烯醚萜总苷的可适用于大生产的制备工艺,并考察了对大鼠常规状况的影响及其尿液相关成分的影响,为进一步研究山茱萸功效物质及其潜在生物活研究奠定了基础。
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