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摘要背景：冠心病（Coronary artery disease, CAD）在全球范围内都有较高的发病率和死亡率，机制复杂，早期诊断困难，因此远期预后较差。铁死亡（Ferroptosis）是一种新发现的铁依赖的细胞程序性死亡。氧化应激引起的内皮细胞损伤和铁死亡与冠心病的发生发展有着密切的联系。环形 RNA（circular RNA，circRNA）是一种稳定的环状非编码 RNA，circRNA 可以通过调控转录、翻译、表观遗传学修饰等影响机体的生物学功能。因此本研究旨在确定H2O2能否通过氧化应激诱导冠状动脉内皮细胞铁死亡，并探索其中关键的 circRNA 以及调控铁死亡的机制。<br>　　方法：1）通过活细胞计数（Cell Counting Kit-8，CCK-8）、还原性谷胱甘肽（Reduced Glutathione，GSH）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、脂质活性氧簇（Lipid reactive oxygen species，Lipid ROS）、蛋白免疫印迹（Western Blot，WB）等实验评估 H2O2刺激人冠状动脉内皮细胞氧化应激进而产生铁死亡的可能，及 Ferrostatin-1（Fer-1）的作用。2）通过转录组测序发现差异 circRNA，分析可能的功能，采用实时荧光定量 PCR （Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）验证差异 circRNA。3）通过RNase R 消化实验验证人冠状动脉内皮细胞的 hsa_circ_0002665 的稳定性，并通过核质分离实验对其定位。4）通过干扰hsa_circ_0002665的表达确定其功能。5）预测hsa_circ_0002665下游MicroRNA（miRNA）及mRNA，并通过RT-PCR、RNA结合蛋白免疫共沉淀（RNA binding protein immunoprecipitation， RIP）、双荧光素酶报告基因实验验证调控关系。6）转染 miR-195-5p mimics 验证 miR-195-5p 调控铁死亡。7）转染 si-SAT1 验证其功能。8）转染和共转染si-hsa_circ_0002665、miR-195-5p inhibitor、si-SAT1 对其调控关系进行功能回复。<br>　　结果：1）H2O2处理人冠状动脉内皮细胞后，细胞活性、GSH明显降低，LDH、MDA、Lipid ROS、铁离子、精脒/精胺 N1-乙酰基转移酶 1（spermidine/spermine N1-acetyltransferase 1，SAT1）和花生四烯酸-15-脂加氧酶（Arachidonate15-Lipoxygenase，ALOX15）等明显增高，再加入Fer-1后细胞活性、GSH升高， LDH、MDA、Lipid ROS、SAT1 和 ALOX15 等降低。2）转录组分析结果表明在H2O2处理组中有18个circRNA升高，17个circRNA降低，功能分析有铁死亡通路富集。3 ） RT-PCR 结果表明 hsa_circ_0007127 ， hsa_circ_0003571 ， hsa_circ_0002995 ， hsa_circ_0001558 ， hsa_circ_0002665 ， hsa_circ_0000530 ， hsa_circ_0005941，hsa_circ_0021570，hsa_circ_0009353 和 hsa_circ_0001806 在对照组和处理组中有明显差异，Sanger测序hsa_circ_0000530，hsa_circ_0001558， hsa_circ_0002665，hsa_circ_0002995，hsa_circ_0005941 和 hsa_circ_0021570 有环化位点。4）hsa_circ_0002665 耐 RNA酶消化，并主要存在细胞质中。5）干扰 hsa_circ_0002665 可以抑制 H2O2 处理人冠状动脉内皮细胞的铁死亡。6） hsa_circ_0002665可能与miR-195-5p结合并有负性调控关系，miR195-5p可能与SAT1 结合负性调控。7）转染 miR-195-5p mimics 后 H2O2处理人冠状动脉内皮细胞的铁死亡明显减轻。8）转染si-SAT1后H2O2处理人冠状动脉内皮细胞的铁死亡明显抑制。9）降低miR-195-5p表达减弱了干扰hsa_circ_0002665对H2O2处理的人冠状动脉内皮细胞铁死亡的保护作用，而这一作用可以被si-SAT1所逆转。<br>　　结论：H2O2处理人冠状动脉内皮细胞，可以引起人冠状动脉内皮细胞铁死亡， hsa_circ_0002665可以通过miR-195-5p/SAT1轴调控人冠状动脉内皮细胞铁死亡。