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摘要发热伴血小板减少综合征(Severefeverwiththrombocytopeniasyndrome，SFTS)是由发热伴血小板减少综合征病毒（Severefeverwiththrombocytopeniasyndromevirus，SFTSV）引起的一种以显著发热和血小板减少为主要症状的新发传染病，又称蜱虫病。我国首次发现并报告了该病，其病原体已在多个国家被检出，并已证实可导致人类死亡。自发现以来，SFTS的发病率持续上升，已报道在动物中具有较高的血清阳性率，并且在家畜中以牛羊感染率最高，对我国农业生产构成威胁。人感染后表现全身炎症性反应综合征（Severesystemicinflammatoryresponsesyndrome，SIRS），然而，对于SFTS的不同患者而言，其具体的发病机制尚未完全阐明。因目前尚无特异性疫苗问世，人感染后死亡率较高，故研究有效治疗策略和疫苗显得尤为迫切。因此，本研究旨在通过构建SFTSV小鼠全身感染模型的方法，探讨色氨酸代谢与SFTSV全身性感染导致的过度免疫应答间的交互机制及其对疾病进展的影响，以期为人类和动物临床治疗提供新的策略。<br>　　1.发热伴血小板减少综合征病毒感染对血清中色氨酸水平的影响<br>　　为了探究SFTSV感染与色氨酸代谢的关系，我们通过预先腹腔注射干扰素受体抗体并在24h后接种SFTSV病毒的方式，在小鼠体内建立的SFTSV全身感染模型。在被SFTSV感染后第五天，采集感染小鼠的内脏组织及血液样本，利用绝对荧光定量PCR的方式评估脾脏中的病毒载量，并通过相对荧光定量PCR技术检测到炎症因子转录水平的升高。此外，通过观察组织病理切片揭示了感染组织存在不同程度的损伤。进一步通过液相色谱-串联质谱（Liquidchromatography-tandemmassspectrometry，LC-MS/MS）技术检测血清中色氨酸及犬尿氨酸水平，结果显示，感染小鼠脾脏的病毒载量可达104拷贝/mg，脾脏、肝脏和肺脏中IL6的转录表达水平显著增高，肺脏组织出现大量炎性细胞浸润，脾脏组织的细胞排列混乱且部分区域出现坏死，证实成功建立了小鼠感染模型。SFTSV感染会导致宿主色氨酸水平显著下降，而犬尿氨酸水平则有所上升。上述动物模型的建立初步展示出在SFTSV感染过程中，色氨酸可能向犬尿氨酸转化。<br>　　2.调控色氨酸代谢酶对发热伴血小板减少综合征病毒感染病程的影响<br>　　在SFTSV感染的小鼠模型中，血清中吲哚胺2,3-双加氧酶1（（IDO1）的活性及其表达量随病程进展而增加，并且组织中IDO1的mRNA水平与疾病的严重性呈正相关。在细胞层面，SFTSV感染时亦导致Ido1转录水平显著升高及蛋白水平上IDO1酶的显著上调。我们构建了Ido1基因敲除SFTSV感染小鼠模型，与WT对照组相比，Ido1-/-组小鼠的存活率显著降低，利用绝对荧光定量PCR检测脾脏中病毒载量，结果显示两组间未发现显著差异，然而Ido1-/-组病理切片显示病理损伤更为严重。进一步采用相对荧光定量PCR技术评估脾脏、肝脏及肺脏组织炎症情况，发现Ido1-/-小鼠炎症标志物显著增加。体外实验中，从Ido1-/-小鼠中分离的BMDM细胞在SFTSV感染也出现炎症因子转录水平显著升高，而在培养基中补充犬尿氨酸，则观察到炎症因子转录水平有所下降，但未见细胞内病毒转录水平发生改变。综上所述，IDO1的表达水平与SFTSV感染密切相关，并且Ido1的基因缺失加剧了宿主的病理损伤。此外，补充犬尿氨酸可以减轻炎症因子的转录水平，但不干扰病毒的复制过程。<br>　　3.色氨酸对发热伴血小板减少综合征病毒感染的保护作用<br>　　通过在感染前14d提供含有不同色氨酸含量的饲料，并以此为基础进行小鼠感染试验。结果显示，在色氨酸缺乏的条件下，小鼠经SFTSV感染后其体重显著下降且难以恢复，同时伴有较高的死亡率。此外，色氨酸缺乏组小鼠体内的炎症因子转录水平显著升高，且组织病理学检查显示其损伤程度更为严重。这些发现提示色氨酸在宿主体内抵抗SFTSV感染过程中发挥着关键的保护作用，能够有效减缓疾病的进展并减轻病理损害。<br>　　综上所述，我们成功建立了SFTSV小鼠感染模型，SFTSV感染后可导致色氨酸浓度显著下降，色氨酸代谢关键酶IDO1的敲除后导致小鼠感染呈现更严重的病程；补充色氨酸能减缓SFTSV感染后的进程及病理损伤。