摘要目的:慢性淋巴细胞白血病(CLL)是成人中常见的白血病类型,目前仍是不可治愈的疾病。BTK抑制剂是临床上用于CLL一线治疗的药物。但患者治疗后完全缓解率较低,且BTK抑制剂引起的不良反应多见。因此寻找有效的、安全的,可联合BTK抑制剂的药物具有重要意义。槐耳是我国的传统中药,已在实体肿瘤中显示出良好的抗肿瘤作用,但在CLL中的作用尚不清楚。本研究拟探讨槐耳联合BTK抑制剂在CLL中的抗肿瘤作用及相关机制。<br> 方法:以MEC-1和HG3两种CLL细胞系为研究对象。采用CCK8法检测细胞活力,判断槐耳与BTK抑制剂之间的药物相互作用;AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位;PI/Rnase染色法检测细胞周期;细胞转录组学测序检测细胞转录组学差异;荧光实时定量PCR检测特定基因的表达;蛋白质印迹分析检测特定蛋白的含量。并且构建MEC-1细胞小鼠皮下移植瘤模型,检测槐耳联合BTK抑制剂在体内对CLL的作用。<br> 结果:体外实验表明,槐耳呈剂量依赖性和时间依赖性地抑制CLL细胞系的细胞活力,并与BTK抑制剂(伊布替尼、泽布替尼)具有协同效应。槐耳联合BTK抑制剂(伊布替尼、泽布替尼)通过促进凋亡蛋白的活化、抑制抗凋亡蛋白的表达并降低细胞线粒体膜电位,进而诱导CLL细胞系的细胞凋亡。此外,槐耳联合BTK抑制剂(伊布替尼、泽布替尼)通过阻滞细胞周期在G0/G1期、抑制BTK及其下游NF-кB和PKB信号通路分子的表达和活化及促进GADD45g分子的表达抑制CLL细胞系的细胞增殖。在体内实验中,槐耳联合伊布替尼在小鼠CLL皮下移植瘤模型中显著抑制肿瘤的生长,并且无肝肾毒性。<br> 结论:上述结果表明,槐耳具有抑制CLL细胞增殖、诱导凋亡的抗肿瘤活性,与BTK抑制剂(伊布替尼、泽布替尼)合用对CLL的抗肿瘤作用具有协同作用。槐耳联合BTK抑制剂(伊布替尼、泽布替尼)时可更有效地抑制CLL细胞增殖和细胞活力,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期,其机制可能与BTK及其下游NF-кB和PKB信号通路活化抑制和GADD45g分子表达上调密切相关。槐耳联合BTK抑制剂治疗CLL的有效性、安全性及其分子机制值得进一步深入探索和研究。
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