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摘要血吸虫病是一种在全球广泛传播且极易被忽视的热带病（NTDs），对多个发展中国家的经济造成严重影响。日本血吸虫病由日本血吸虫感染终末宿主引起，主要传播途径是由毛蚴感染水体中的中间宿主（钉螺），发育为尾蚴后逸出，经皮肤侵入终末宿主最终发育为成虫。成虫在宿主的门静脉-肠系膜静脉中寄生并产卵，卵进入肠腔随粪便排出，从而完成其生活史。日本血吸虫病对人体的肝脏损伤严重，会引起肝硬化、腹水、巨脾等诸多病症，被世界卫生组织（WHO ）列为易发病且致死率高的六大热带病之一。本研究基于一种人与自然可持续平衡发展的全健康（OneHealth）理念，构建覆盖日本血吸虫传播全链条的分子检测体系，着重研究终宿主、中间宿主和环境生态系统对日本血吸虫病传播的影响，对该病的防控具有重要意义。主要结果如下：<br>　　（1）基于日本血吸虫基因组数据库信息，筛选出日本血吸虫特异核酸序列。该序列在血吸虫不同个体中的相似度超过99.8%，而与其他寄生虫（如广州管圆线虫、华支睾吸虫等）核酸序列相似度低。针对该序列建立的实时荧光定量PCR（ qPCR）检测方法可特异性识别日本血吸虫DNA，与检测的其他病原体（如细菌、原虫等）均无交叉反应，因此证明该方法可以用于检测日本血吸虫基因组DNA。<br>　　（2）对61只人工感染的日本血吸虫阳性钉螺和61只未感染的钉螺分别进行基因组DNA提取和检测，结果显示所有阳性钉螺均可检出（敏感性为100%），未感染的钉螺均未检出（特异性为100%）。此外，将阳性钉螺与阴性钉螺进行1∶999混合后提取基因组DNA，仍能稳定检测出阳性结果。通过对野外采集的2500只钉螺进行50只一起提取DNA制成一份样本，10份DNA样本混合后进行检测，结果均为阴性，证明该方法适用于钉螺的大规模筛查，可显著提升疫区钉螺的监测效率。<br>　　（3）在人工加入日本血吸虫毛蚴（或尾蚴）的水体中，当每500毫升水体中含3条及以上毛蚴（或尾蚴）时，可稳定检测为阳性；而每500毫升水体中毛蚴（或尾蚴）数量低于3条时，无法稳定得到阳性结果或无法检出。因此，该方法可为疫区水体的监测提供有效手段。<br>　　（4）对若干只人工感染不同尾蚴条数（5、10、20、40条）和不同感染时间的小鼠肝脏样本（4、5、6周）进行检测，结果均呈阳性，结果说明该方法可有效检测不同尾蚴感染量的小鼠肝脏样本。对疫区野外捕获野鼠的肝脏检测结果显示， 233只安徽省疫区捕获野鼠的肝脏阳性率为68.24%（ 159/233 ， 95%CI:61.95%-74.11%），64只江西省疫区捕获野鼠的肝脏阳性率为9.38%（6/64，95%CI:3.76%-19.04%）。相较于肝脏压片镜检法，该方法可有效提高阳性检出率。因此，该方法可用于疫区野鼠肝脏样本的监测。<br>　　（5）通过对不同尾蚴感染量小鼠的粪便检测中发现，小鼠在血吸虫感染35天和42天的粪便样本均可稳定检出阳性；但在感染32天、28天、25天时，检测的阳性结果不稳定。而相应天数未感染小鼠的粪便检测结果均为阴性。因此，该方法具有监测疫区野鼠等野生物粪便样本的潜力。<br>　　综上，本研究成功构建了一种涵盖日本血吸虫生活史（包括虫卵、毛蚴、胞蚴、尾蚴及成虫阶段）的qPCR检测方法，该方法在虫体不同发育阶段的相应样本检测中均展现了较高的敏感性和特异性，为我国血吸虫病消除阶段的精准监测及防控提供了有效方法。