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摘要目的：<br>　　1. 明确快速生长表型CRECL的生长适应性特点及其稳定性。<br>　　2. 初探快速生长表型 CRECL 生长适应性增强的机制，为预测CRECL的流行规律，控制CRECL的流行传播提供参考依据。<br>　　方法：<br>　　1. 计算平均生长速率筛选40株快速生长表型CRECL，把快速生长表型CRECL定义为观察组，阴沟肠杆菌ATCC700323定义为对照组。<br>　　2. 采用修正的Gompertz方程拟合生长曲线，统计比较两组的生长适应性参数。<br>　　3. 将两组连续传代30次，绘制每10次传代的生长曲线，计算比较传代前后的生长适应性参数。<br>　　4. 利用串联质谱标记技术检测对比两组的蛋白组学，采用qRT-PCR技术从转录水平验证蛋白组学结果。<br>　　5. 利用高效液相色谱串联质谱非靶技术检测对比两组的代谢组学。<br>　　6. 联合分析两组学结果，明确关键生物标志物。<br>　　7. 采用丁香酚抑制磷酸转移酶系统（PTS），探讨PTS对快速生长表型CRECL生长适应性的影响。<br>　　8. 基于同源重组原理构建manX基因缺失突变株CRECL-ΔmanX。<br>　　9. 采用无缝克隆技术构建携带manX基因的表达载体，采用化学转化法构建CRECL-CΔmanX回补株。<br>　　10. 绘制生长曲线，分析比较CRECL野生型菌株（CRECL-WT） CRECL-ΔmanX和CRECL-CΔmanX的生长适应性。<br>　　11. 使用BPROM和BDGP数据库预测CRECL和ATCC700323菌株的manX基因启动子和转录因子结合位点；运用WebLogo网站创建启动子序列徽标图。<br>　　12. 构建绿色荧光蛋白重组表达质粒，测定荧光值，评估启动子的活性。<br>　　结果：<br>　　1. 观察组的最大生长速率（um）和平均生长速率分别为1.6549±0.0286和0.5290±0.0024，而对照组则为1.5297和0.5230，两组差异均有统计学意义（P＜0.05）；观察组的延滞时间（λ）和世代时间（ G ）分别为0.1559±0.0156和0.1819±0.0032 ，而对照组则为0.1936和0.1968，两组差异均有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　2. 快速生长表型CRECL的um、λ、G和平均生长速率在传代前后的差异均无统计学意义（P＞0.05）。<br>　　3. 蛋白组学和代谢组学联合分析富集到86条KEGG通路，其中PTS在两个组学KEGG通路中均被显著富集（P＜0.05）。<br>　　4. 普通培养的快速生长表型CRECL的um、平均生长速率、λ和G分别为 1.0359±0.0318、0.4498±0.0069、0.1998±0.0306 和0.2908±0.0090，而加入亚致死剂量丁香酚的快速生长表型CRECL则为0.8736±0.0292、0.3750±0.0111、0.3026±0.0226和0.3449±0.0116 ，两组差异均有统计学意义（ P＜0.05 ）；普通培养的快速生长表型CRECL的ptsI基因表达量高于加入亚致死剂量丁香酚的快速生长表型CRECL（P＜0.05）。<br>　　5. manX 基因敲除株对甘露糖利用有明显影响，与 CRECL-ΔmanX的um（1.5057±0.0140）和平均生长速率（0.5235±0.0019）相比，CRECL-WT和CRECL-CΔmanX的um（1.6327±0.0076和0.5314 ±0.0014）和平均生长速率（1.6457±0.0287 和 0.5319±0.0010）明显快（ P＜0.05 ）；与 CRECL-ΔmanX 的 λ（ 0.2224±0.0124 ）和 G （ 0.1999±0.0019 ）相比， CRECL-WT 和 CRECL-CΔmanX 的 λ（ 0.1541±0.0074 和 0.1596±0.0073 ）和 G （ 0.1844±0.0009 和0.1829±0.0032）明显短（P＜0.05）。<br>　　6. 观察组-10区和-35区的保守序列分别为TATTNT和TTNAAA，而对照组-10区和-35区的保守序列分别为TAANAT和TTCANG。<br>　　7. 观察组的manX基因启动子表达明显强于对照组，两组菌启动子在M9+0.4%甘露糖培养基中表达差异大于在LB培养基中差异（P＜0.05）。<br>　　结论：<br>　　1. 快速生长表型 CRECL的生长适应性明显增强。<br>　　2. 快速生长表型 CRECL具有较好的遗传稳定性。<br>　　3. PTS 与快速生长表型 CRECL生长适应性增强关系密切，其中甘露糖 PTS 起关键作用，其关键基因 manX 高表达是重要原因，而manX基因高表达是其启动子高表达所致。